中国极地微生物的研究进展.pptxVIP

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会计学;中国极地微生物学考察研究简史 ;(一)类别 目前中国所取得的南极微生物主要类别见表2。;;;;(三)极地微生物的开发利用研究;;;;;传统的环境微生物生态学研究方法采用计数、微生物培养及鉴定,生理生化分析等手段进行,这些方法在很大程度上依赖于微生物的培养和纯种分离技术。 纯培养很难,尤其是在南北极这样的极端环境中。现有研究认为在自然界中仅有0.001%一1%的微生物能够用现有的技术手段进行人工培养。而且经过平板培养微生物有机体还有可能会偏离原来自然种群的生理习性,甚至有可能偏离它们原来的基因型组合。 随着各种分子生物学技术的应用,使我们不必培养微生物,而直接通过对环境中的遗传物质的研究来达到目的,也为从分子水平上开展较为全面的、无偏差的微生物生态学研究开辟了新的途径。;(一)从自然样品中直接提取核酸: 从环境样品中提取核酸的方法可分为两类,一是转移后裂解法,即先将微生物菌体与土壤颗粒分开,再提取DNA。另一类是直接裂解法,即在土壤中直接裂解微生物菌体后提取DNA。相比之下,直接裂解法可以提取出沉积物样品中近乎所有的微生物种群,且DNA产量大。在高效裂解细胞的同时对己释放出的DNA不予破坏是提高DNA产出率的决定因素。目前己报道的裂解法有碾磨法、超声波裂解法、液氮冻融法、变性剂热裂解法、酶解法等。 ;(二)分子生物学分析;;;;;;;;DGGE变性剂浓度的选择,电泳时间的选择,染色方法的选择 电泳时间的选择: 采用了时间间歇(timetravel)的方法,每隔一小时加一次样,最终根据图谱清晰分离度来确定出最合适的时间。 染色方法的选择: EB染色后所显现的条带要少一些(只能染双链DNA,不能染单链DNA),所以这种方法的灵敏度要低一些。相较而言,银染法的灵敏度就高了(因为它单双链DNA都能染色)。但是它无法顺利的从条带中回收出DNA。 因次在构建和观察指纹图谱时采用银染法。在要做回收克隆测序的工作时,则采用EB染色。 ;③限制性片段长度多态性分析(RFLP, Restriction Fragment Length Polymorphism) RFLP技术的基本原理是根据不同生物个体或种群之间DNA片段酶切位点有所差异的特点,利用限制性内切酶进行消化,产生长短、种类、数目不同的限制性片段,然后对这些特定DNA片段的限制性内切酶产物进行分析。凡是可以引起酶切位点变异的突变包括点突变(新产生和去除酶切位点)、基因插人或缺失(插入和缺失造成酶切位点间的长度发生变化)等均可导致多态性的产生。将PCR技术与RFLP分析相结合,用于研究环境中微生物多样性及群落分布,具体方法是采用特定的引物,如16S rRNA基因通用引物对环境样品的总基因组DNA进行PCR扩增,将扩增产物用不同的限制性内切酶酶切,通过电泳分析比较酶切带型,对特殊带型的序列进行测定,进而了解该样品中所包含的微生物序列信息。该方法广泛用于环境微生物多样性及其群落结构的研究。 ;;;;;;;;国际极地微生物考察研究在经历探险、观察、分类描述、获取和保存样品、起源、系统和生理学之后,已开始转入起源、系统、生理及生物学适应机制及其它生态系统、能流、物流中的作用、地位研究。一些成果涉及微生物适应性机理的分子水平的探讨,以及活性物质的应用前景研究,并趋向作为一个分支而参与多学科、综合性的跨地区、跨学科的考察研究。 因此摆在中国学者面前的任务也必须高起点、高标准。就是要高瞻远瞩,有一个系统化的全面综合考虑。投入足量的经费、配备先进的仪器设施,吸引高素质人才,并积极参与国际项目的调查研究,如冰盖、干谷、内陆山脉、极地荒漠、冻土带、深海、环境等领域。尽力争取更多机会参与实地考察,为采集各种样品提供保障,以取得符合微生物学研究要求的第一手样品,为后续的精心研究提供支持。扩大研究内涵,并不断深化。从微生物的鉴定、生态环境、微生物与环境的相互作用,如在元素迁移循环、食物链/网/环、生态系统中的作用,治疗人体疾病及生物活性物质的开发利用等等,持之以恒地研究下去。 打好坚实的基础,注重原创性研究,尽可能高水准地科学认知、开发和利用好极地微生物这一宝贵资源,真正造福于全人类,并使之永久持续健康发展。

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