霉菌的制片与染色.pptxVIP

霉菌的制片与染色会计学一、实验目的第1页/共13页学习并掌握观察霉菌形态的基本方法；初步了解霉菌的形态特征；学习并掌握霉菌的制片和简单染色基本技术。二、实验原理第2页/共13页1、霉菌：呈菌线体形态，但霉菌的菌丝和孢子比放线菌的粗得多。霉菌的菌落形态较大，质地疏松，外观干燥，不透明，菌落与培养基间连接紧密，不易挑取，菌落正反面，边缘与中心的颜色、构造通常不一致，有霉味。菌丝的孢子较大，在低倍镜下即可清晰观察到有隔或无隔菌丝和孢子及巨大的孢子囊第3页/共13页2、制标本时常用乳酸石炭酸棉蓝染色液，用此染液做霉菌制片的特点是细胞不变形，具有杀菌、防腐作用，不易干燥，能保持较长时间，能防止孢子四处飞散，棉蓝具有一定的染色作用，染液的蓝色能增大反差。（如果用水封片，常因渗透作用而膨胀，水也易使菌丝、孢子和气泡混为一团，影响观察。）第4页/共13页第5页/共13页第6页/共13页三、实验器材第7页/共13页1、菌种：毛霉48h马铃薯琼脂平板培养物、黑曲霉48h马铃薯琼脂平板培养物2、溶液试剂：乳酸石炭酸棉蓝溶液3、仪器及其他用品：酒精灯、镊子、载玻片、盖玻片、解剖针、显微镜、50%乙醇。四、实验步骤第8页/共13页1、直接制片观察（1）在载玻片上滴加一滴乳酸石炭酸棉蓝染色液。（2）用镊子从生长有霉菌的斜面挑取霉菌菌丝（3）用50%的乙醇浸润，洗去脱落孢子再用蒸馏水将浸过的菌丝洗一下（4）放入载玻片上的液滴中，仔细地用解剖针将菌丝分散开来。（5）盖上盖玻片（勿使产生气泡，且不要再移动盖玻片）。（6）镜检：先用低倍镜。再转换高倍镜镜检并记录观察结果第9页/共13页2、透明胶带法：（1）、在载玻片上滴加一滴乳酸石炭酸棉蓝染色液（2）、食指与拇指黏在一段透明胶带两端，使胶带呈U形，胶面朝下（3）、胶面轻触霉菌表面（4）、将黏在胶面的菌体浸入载玻片上的乳酸石炭酸棉蓝染色液中，并将胶带两端固定在载玻片两端（5）、低倍镜、高倍镜镜检注意：第10页/共13页注意取菌时，镊子取菌、解剖针挑取少量菌丝时，尽量减少菌丝断裂及形态破坏；盖盖玻片勿使产生气泡，且不要再移动盖玻片；尽可能将菌丝分开，以免菌丝太厚，不易于显微镜观察；加盖玻片时勿压入气泡，以免影响观察；注意无菌操作，且挑取菌丝前镊子和接种环要在酒精灯上灼烧灭菌第11页/共13页实验结果：1、绘图并说明黑曲霉和毛霉的形态特征；2、绘图标本各种菌形态特征第12页/共13页 That’s allThanks