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- 2023-02-02 发布于江苏
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紫苏 ω-3 FAD 基因的克隆与转基因研究
实验设计:
杨长友 20111109035
一、基因克隆
1、在 NCBI 的 GenBank 数据库中搜索已发表的相关植物的FAD 基因序列,设计合成针对紫苏FAD 同源基因的简并引物或特异引物;
2、以紫苏种子为材料利用试剂盒提取mRNA;
3、用琼脂糖凝胶电泳进行检测;
4、用前面设计好的引物进行反转录PCR(RT-PCR);
5、将 PCR 产物进行琼脂糖凝胶电泳;
6、用试剂盒回收目的片段(CDS 片段);
7、进行PCR 并用琼脂糖凝胶电泳检测PCR 产物;
8、将目的片段与质粒载体连接,然后将连接载体与大肠杆菌感受态细胞一起在 37
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