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国内外应用最广的分析方法有: 三硝基苯磺酸法、2-氯-3,5-二硝基吡啶法、离子交换色谱法(氨基酸自动分析仪法) 、DBL法。 前两种方法共同缺点是操作手续繁长费时，还需要某些特殊的试剂。 离子交换色谱法仍然被认为是标准法，但仪器昂贵不能普及。 DBL法简便、快速、准确,适用范围广,适用于各种谷物及食品的分析,被定为国标方法。 第三十页，共四十六页。 DBL法的原理 在较强酸性(pH值2-3)条件下,样品蛋白质中的3种碱性氨基酸,即赖氨酸、组氨酸和精氨酸可与酸性橙12染料(AO-12,一种单磺酸盐)分子结合,生成不溶性络合物，其染料的被结合量相当于赖氨酸、组氨酸和精氨酸的总和； 取相同的另一份样品,先用丙酸酐作为掩蔽剂将赖氨酸的ε-氨基掩蔽,然后再与AO-12染料反应,所得染料的结合量只是组氨酸和精氨酸二者之和，根据两次染料结合量（DBC）的差值,即可算出该样品中蛋白质的赖氨酸。 第三十一页，共四十六页。 ????????? O?????? O ????????????????????????????????????? êê?????? êê ??? 赖氨酸的 e—NH2? +?? CH3—CH2—C—O—C—CH2—CH3 ?? 　 ????????????????????? O?????????????? 丙酸酐 ??????