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会计学
1
实验二重金属污染对植物叶绿素含量
实验目的
掌握叶绿素含量的测定
了解重金属污染对叶绿素含量的影响
了解在重金属胁迫条件下的变化趋势
第1页/共13页
实验原理
植物叶绿素分叶绿素a和叶绿素b,其含量的高低是反映植物光合作用能力的一个重要指标
叶绿素含量的变化可以反映污染对植物光合作用的影响
第2页/共13页
实验仪器与材料
仪器:研钵、滤纸、漏斗、5 mL移液管、分光光度计等
材料:小麦
试剂:丙酮(80%) 、石英砂、氯化铬(Cd 2+)系列溶液(0、5、10、25、50mg/L)
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实验步骤1:实验材料培养
将大小比例均匀的种子用蒸馏水浸泡、吸胀后,移入铺有2层滤纸的培养皿中,置入光照培养箱中培养(22 ℃ ~25℃)
第4页/共13页
实验步骤2:分组染毒处理
在种子长出2片真叶后,分别用5个不同浓度的重金属氯化铬溶液处理
每组3个平行处理
第5页/共13页
实验步骤2:分组染毒处理
每天用蒸馏水冲洗1次,再用原组重金属溶液培养
培养1周后,即可用
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实验步骤3:叶片中叶绿素提取
取新鲜植物叶片0.1g (5株等长植物)
剪碎,放入研钵中,加入80%丙酮和少量(3 ~ 4粒)石英砂研成糊状,再加3mL 80%的丙酮,继续研磨至组织变白
第7页/共13页
实验步骤3:叶片中叶绿素提取
在暗处静置3 ~ 5min后,用一层滤纸过滤到30mL烧杯中
用滴管吸取80%丙酮将研钵和滤纸周围洗脱色素
待滤纸和残渣全部变白后,用80%丙酮定容至20mL
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实验步骤4:测定吸光度
先用少量色素提取液清洗比色皿2 ~ 3次,然后将色素提取液倒入比色皿中
80%丙酮作空白对照
在波长分别为663nm、645nm条件下测定提取液的吸光度。如果浓度较高,适当稀释后比色定量。
第9页/共13页
计算叶绿素含量
叶绿素a和b及总叶绿素的浓度分别为:
Ca、Cb和CT,可根据下式计算:
Ca663645
Cb645663
CT663645
式中:A663、A645分别为提取液在波长663nm、645nm下的吸光度。
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数据处理与实验结果分析:
每个处理组的平行测定结果用平均数±标准误( ̄ ±SE)表示,用One-Way ANOVA分析不同处理间的差异性。可Excel做图,展示实验结果并分析。
X
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Let’s do it!
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