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《环境工程专业实验（一）》实验教学大纲 课程代码：ABCL0808 课程中文名称: 环境工程专业实验（一） 课程英文名称：Environmental Monitoring Experiment 课程学分数：3 课程学时数：48 授课对象：环境工程专业本科生 本课程的前导课程：《无机化学》、《有机化学》、《物理化学》、《环境监测技术》、《环境工程微生物》 一、实验课程简介 本实验课程是环境工程专业学生必修的一门专业实验课程，包括《环境监测技术》和《环境工程微生物》2门专业课程的实践环节。通过实验，加深学生对环境监测技术和环境工程微生物基础理论的认识，学会使用相关的仪器、设备，掌握一般的实验技能；同时，培养学生实验设计、分析问题和解决问题的能力。 二、实验项目的设置与要求 （一）实验安排 序号 实验项目 实验学时 实验类型 每组人数 实验类别 1 光学显微镜操作及微生物个体形态的观察 2 验证 1-2 必做 2 微生物大小与数量的测定 4 验证 1-2 必做 3 微生物的染色 2 验证 1-2 必做 4 培养基的制备，纯菌种的分离、培养和接种技术 8 综合 2-3 必做 5 天然水硬度的测定 4 综合 2-3 必做 6 溶解氧的测定 2 验证 1-2 必做 7 氨氮的测定 3 验证 1-2 必做 8 化学需氧量的测定 4 验证 1-2 必做 9 大气中二氧化氮的测定 3 验证 1-2 必做 10 降水的测定 2 综合 2-3 必做 11 窑炉烟气分析 2 综合 2-3 必做 12 地表水水质监测 8 综合 3-5 必做 13 校园空气质量监测 4 综合 3-5 必做 （二）实验项目的目的和要求 1、光学显微镜操作及微生物个体形态的观察实验 实验项目名称：光学显微镜操作及微生物个体形态的观察 内容提要：从镜箱中取出显微镜，做好必要的清洁和安排工作。调节光源，先用低倍镜观察，再用高倍镜观察，最后用油镜观察。之后，依低倍、高倍和油镜的次序观察杆状、球状、弧状和丝状的细菌示范片，用铅笔分别绘出各种细菌的形态图。将各部分还原，反光镜垂直于镜座，将接物镜转成八字形，再向下旋。罩上镜套，然后放回镜箱中。 实验目的：了解光学显微镜的结构、各部分的功能；掌握光学显微镜的使用、保养方法；观察几种微生物的个体形态，学习用压滴法制作标本片。 教学方法与手段：学生分组动手操作，教师现场指导。 实验要求：实验前写好预习报告，按要求分组完成实验操作，独立完成实验报告。实验过程中注意显微镜镜头的保护和保养；使用显微镜时应据不同的物镜而调节光线。 2、微生物大小与数量的测定实验 实验项目名称：微生物大小与数量的测定 内容提要：通过显微测微尺测量酿酒酵母和枯草芽孢杆菌的直径或长和宽，对其细胞体的大小有一个具体的了解；使用血细胞计数板对稀释n倍的酵母菌悬液进行细胞数量的测定，从而达到定量了解微生物的生长情况。 实验目的：了解显微镜测定微生物大小与血球计数板测定微生物数量的原理；学习并掌握显微镜下测定微生物细胞大小的技术，包括目镜测微尺、镜台测 微尺的校正技术与测定细胞大小的技术；了解血球计数板的结构，学习并掌握血球计数板计数微生物数量的技术，包括样品的点样、菌数计数的方法与计算。 教学方法与手段：学生分组动手操作，教师现场指导。 实验要求：实验前写好预习报告，按要求分组完成实验操作，独立完成实验报告。由于不同显微镜及附件的放大倍数不同，因此校正目镜测微尺必须针对特定的显微镜和附件（特定的接物镜、接目镜、镜筒长度等）进行，而且只能在这特定的情况下重复使用。计数前，应该要静置一会儿，以免测定时菌体还在移动。并且，应该要用镊子轻轻的压盖玻片，以免每个小格里的微生物过饱和，给计数带来误差。计数时，为避免重复或遗漏计数，如菌体位于中格的双线上，计数时则数上线不数下线，数左线不数右线，以减少误差。 3、微生物的染色实验 实验项目名称：微生物的染色 内容提要：首先采用一种染液对培养液中的细菌进行普通染色镜检，再对细菌进行革兰氏复染。 实验目的：巩固油镜的使用方法；学习微生物涂片、染色基本技术，掌握细菌的简单染色法；学习、掌握细菌的革兰氏染色法；建立“无菌操作”的概念。 教学方法与手段：学生分组动手操作，教师现场指导。 实验要求：实验前写好预习报告，按要求分组完成实验操作，独立完成实验报告。实验操作时应严格把握脱色时间，选用培养了18-24小时的细菌，干净的玻片、热固定、每一步水洗要彻底并且吸干。 4、培养基的制备，纯菌种的分离、培养和接种技术实验 实验项目名称：培养基的制备，纯菌种的分离、培养和接种技术 内容提要：首先学习用报纸捆包培养皿和试管，称量分装好培养基后放入灭菌锅蒸汽灭菌，之后从活性污泥中采用稀释涂平板的方式，划线分离获得纯菌株。 实验目的：学会玻璃器皿的洗涤、包扎和灭