化学因素对微生物的影响实验报告.pdfVIP

化学因素对微生物的影响实验报告 一、实验目的 了解化学因素的杀菌和消毒作用，掌握常用消毒剂的浓度和使用方法。 二、实验原理 常用的化学消毒剂主要有重金属及其盐类，酚、醇、醛等有机化合物以及碘、 表面活性剂等。它们的杀菌或抑菌作用主要是使菌体蛋白质变性，或者与酶 的―SH基结合而使酶失去活性所致。 本实验是观察某些常用的化学药品在一定浓度下对微生物的致死或抑菌作 用，从而了解它们的杀菌或抑菌性能。 为了比较各种化学消毒剂的杀菌能力，常以石炭酸为标准，即将某一消毒剂 作不同稀释后，在一定条件下，一定时间内致死全部供试微生物的最高稀释浓度， 与达到同样效果的石炭酸的最高稀释度的比值，称为这种消毒剂对该种微生物的 石炭酸系数（酚系数）。石炭酸系数越大，说明该消毒剂杀菌能力越强。 三、材料 1、菌种：大肠杆菌、葡萄球菌 2、试剂：95%乙醇、75%乙醇、4%的石炭酸，10%84消毒液、2%碘伏、无菌水 四、实验内容 1、将配制好的牛肉膏蛋白胨培养基倒平板。 2、各取 0.2ml 过夜培养好的大肠杆菌和金黄色葡萄球菌涂平板。（每种菌种涂 两个）。 3、将上述已凝固的平皿用记号笔在平皿底划成六等份，每一等份内标明一种药 物的名称。 4、菌镊子将小圆形滤纸片分别浸入各种药品中，取出，并在试管内壁上除去多 余药液后，以无菌操作将纸片对号放入培养皿的小区内。 5、述放好滤纸片的含菌平皿，倒置于 37℃温室中培养 24 小时后，取出测定抑 菌圈大小，并说明其杀菌强弱。 五、实验报告 1、结果记录 不同的消毒剂对大肠杆菌的抑菌效果 95% 75 4% 10%84 2%碘伏 无菌水 酒精 酒精 石炭酸 消毒液 抑菌圈直径 抑菌率 不同的消毒剂对金黄色葡萄球菌的抑菌效果 95% 75 4% 10%84 2%碘伏 无菌水 酒精 酒精 石炭酸 消毒液 抑菌圈直径 抑菌率 抑菌率= （菌圈直径—滤纸片直径）/滤纸片直径＊100% 84 消毒液 2．思考题 化学药剂对微生物所形成的抑菌圈未长菌部分是否说明微生物细胞已被杀死？ 菌种保存 需保存的菌种：酵母菌（要求保存一个月以上）、黑曲霉（要求保存一年以上） 该实验为设计性实验，请根据所学知识及查阅资料设计菌种保存的方案。 .黑曲霉的保存： 打开安瓿瓶，用吸管滴几滴无菌改良马丁培养基反复吹吸至均匀，转移至无菌 的改良马丁培养基中培养（培养后为1代），培养后取菌悬液接种于改良马丁琼 脂斜面培养（培养后为2代），培养后选取典型菌落接种斜面（3代），可用于试 验中。 2.改良马丁培养基： 成分： 胨 5.0g磷酸氢二钾 1.0g酵母浸出粉 2.0g硫酸镁 0.5g葡萄糖 20.0g水 1000ml 制法：除葡萄糖外，取上述成分混合，微温溶解，调节PH值约为6.8，煮沸， 加入葡萄糖溶解后，摇匀，滤清，调节PH值使灭菌后为6.4±0.2，分装，灭菌。 改良马丁培养基置23～28℃培养。