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- 2023-02-21 发布于浙江
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[考试]紫外圆二色谱分析蛋白结构
紫外圆二色谱分析蛋白结构
根据电子跃迁能级能量的大小,蛋白质的CD光谱分为三个波长范围:
(1) 250nm以下的远紫外光谱区,圆二色性主要由肽键的电子跃迁引起;
(2) 250,300nm的近紫外光谱区,主要由侧链芳香基团的电子跃迁引起;
(3) 300,700nm的紫外-可见光光谱区,主要由蛋白质辅基等外在生色基团引起。
相应地,远紫外CD主要用于蛋白质二级结构的解析,近紫外CD主要揭示蛋白质的三级结构信息,紫外-可见光CD主要用于辅基的偶合分析。
远紫外CD谱:
在蛋白质或多肽的规则二级结构中,肽键是高度有规律排列的,二级结构不同的蛋白质或多肽,所产生CD谱带的位置、峰的强弱都不同。因此,根据所测得蛋白质或多肽的远紫外CD谱,能反映出蛋白质或多肽链二级结构的信息。
紫外区段(190-240nm),α-螺旋的CD谱在192nm附近有一正峰,在208nm、222nm处呈两个负的特征肩峰;β-折叠在216-218nm有一负峰,在185-200nm有一强的正峰;β-转角则在 206nm附近有一正峰;无规则卷曲构象的CD谱在198nm附近有一负峰,在220nm附近有一小而宽的正峰。
近紫外CD光谱:
蛋白质中芳香氨基酸残基,如色氨酸(Trp)、酪氨酸(Tyr)、苯丙氨酸(Phe)及二硫键处于不对称微环境时,在近紫外区250,320nm表现
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