选修微生物培养与应用课件.pptxVIP

微生物的共同特点（小、多、快、强、广）;变酸？;巴斯德;第4页/共72页;课题1 微生物的实验室培养; 了解有关培养基的基础知识，无菌技术的操作，进行微生物的培养。;1.何为培养基？;;液体培养基 固体培养基;练习;碳源;培养基的主要成分;氮 源;;下列叙述错误的是（ ） A.培养乳酸菌时需要在培养基中添加维生素 B.培养霉菌时需将培养基中的pH调至碱性 C.培养细菌时需将pH调至中性或微碱性 D.培养厌氧微生物时则需要提供无氧的条件;1、何为无菌技术？无菌技术包括哪些方面？ 2、消毒和灭菌的区别？ 3、常用的消毒方法有哪些？ 4、常用的灭菌方法有哪些？ ;1.获得纯净培养物的关键：;练习;消毒 　使用较为温和的物理或化学方法，杀死物体表面或内部的部分微生物(不包括芽孢和孢子)。;1、煮沸消毒法: 100℃煮沸5-6min，日常生活中广泛应用 2、巴氏消毒法： 70-75 ℃煮30min或80℃煮15min，牛奶、啤酒等不宜进行高温消毒的 3、化学药剂消毒法: 75%酒精、氯气、石炭酸、煤酚皂溶液等 4、紫外线消毒法： 用于接种室空气消毒 ……;1、灼烧灭菌： 用于微生物接种工具，如：接种环、接种针或其他金属用具等，及接种过程中试管口或锥形瓶口的灭菌 ;2、干热灭菌： 160-170 ℃下加热1-2h。 用于玻璃器皿、金属用具等能耐高温、需保持干燥的物品。 3、高压蒸气灭菌： 100kPa、121 ℃下维持 15-30min. 广泛用于培养基及多种器材、物品。;P16 请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果需要，请选择合适的方法。 （1） 培养细菌用的培养基与培养皿 （2） 玻棒、试管、烧瓶和吸管 （3） 实验操作者的双手;练习;变形题;练习;练习;关于微生物营养物质的叙述中，正确的是（ ） A.是碳源的物质不可能同时是氮源 B.凡碳源都提供能量 C.除水以外的无机物只提供无机盐 D.无机氮源也能提供能量;下面对发酵工程中灭菌的理解不正确的是 A、防止杂菌污染 B、消灭杂菌 C、培养基和发酵设备都必须灭菌 D、灭菌必须在接种前;二、实验操作;1．计算、称量 2．溶化 3．调pH：　pH7．6　 4．过滤：这一步可以省去。 5．分装：分装过程中注意不要使培养基沾在管口或瓶口上，以免沾污棉塞而引起污染。分装三角烧瓶的量以不超过三角烧瓶容积的一半为宜。 6．加塞 7．包扎;8．灭菌: 将50ml培养基用玻棒转移至三角锥瓶中，塞上棉花塞，包上牛皮纸，再放入高压蒸气灭菌锅，在压力为100kPa、温度为121℃，灭菌15～30min。将培养皿用旧报纸包裹，放入干热灭菌箱内，在160～170 ℃下灭菌2h。; 9．倒平板: 待培养基冷却到50 ℃左右时，在酒精灯附近倒平板。 10．无菌检查： 将灭菌的培养基放入37℃的温室中培养24—48小时，以检查灭菌是否彻底。;倒平板技术;倒平板技术;倒平板技术;倒平板技术; 1.培养基灭菌后，需要冷却到50 ℃左右时，才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？; 2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？;3.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？; 4.在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？;（二）纯化大肠杆菌;平板划线的操作方法;;第45页/共72页;;;;;第50页/共72页;;第52页/共72页;问题讨论; 2.在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？;稀释涂布平板法;稀释;　　1.将分别盛有9mL水的6支试管灭菌，并按101~106的顺序编号。;2.用移液管吸取1mL培养的菌液，注入第一支试管中。用手指轻压移液管上的橡皮头，吹吸三次，使菌液与水充分混匀。;3.从101倍稀释的试管中吸取1mL稀释液，注入102倍稀释的试管中，重复第2步的操作。依次类推，直到完成最后一支试管的稀释。;注意： 移液管需要经过灭菌。操作时，试管口和移液管离火焰1~2cm处.;第61页/共72页;第62页/共72页;第63页/共72页;第64页/共72页;第65页/共72页; 涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求，想一想，第2步应如何进行无菌操作？;菌种的保存;四、课题成果评价 ; （二）接种操作是否符合无菌要求 如果培养基上生长的菌落的颜色、形状、大小基本一致，并符合大肠杆菌菌落的特点，则说明接种操作是符合要求的；如果培养基上出现了其他菌落，则说明接种过程中，无菌操作还未达到要求，需要分析原因，再次练习。;（三）是否进行了及时