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②.“分子缝合针”——DNA连接酶;质粒：结构简单、自我复制、双链环状DNA;③将目的基因导入受体细胞;4、基因工程的应用 ;专题2 2.1植物细胞工程;诱导融合的方法：物理法离心、振动、电激。 化学法聚乙二醇（PEG） 融合完成的标志：杂种细胞再生出细胞壁（高尔基体） 意义：克服了远缘杂交不亲和的障碍。;2.2 动物细胞工程;体细胞;5.动物细胞融合 原理：细胞膜的流动性 诱导方法：物理、化学、生物（灭活仙台病毒） 意义：克服了远缘杂交的不亲和性 应用：制备单克隆抗体;专题3 胚胎工程;1.精子的发生： 时间：初情期到生殖机能衰退 精原细胞通过有丝分裂增殖 场所：睾丸 变形：细胞核——精子头的主要部分 高尔基体——顶体 中心体——精子的尾 线粒体——线粒体鞘膜 其他物质——原生质滴 2.卵子的发生： 时间：初级卵母细胞——在胎儿时期 减一分裂——排卵前后完成 减二分裂——受精过程中完成 场所：卵巢 ;3.受精： 受精场所：输卵管 受精准备：精子获能 卵子（减二中期） 排卵:卵子从卵泡中排出，排出的卵可能是初级卵母细胞 也可能是次级卵母细胞。 受精阶段：顶体反应——穿越放射冠——穿越透明带（透明带反应——第一道屏障）——精子入卵（卵黄膜封闭作用-—第二道屏障）——雄原核、雌原核形成——雌雄原核融合（受精完成标志） 是否受精标志：卵黄膜与透明带间隙可观察到两个极体;4.胚胎发育：受精卵——胎儿（幼体） 卵裂期：有丝分裂，细胞未分化 细胞数量增加，有机物总量减少，总体积不增加或略有减小。每个细胞体积变小，DNA不变。 桑椹胚：32个细胞左右的胚胎 全能细胞 囊胚：细胞开始分化 内细胞团：将来发育成胎儿的各种组织； 滋养层细胞：将来发育成胎膜和胎盘 囊胚腔 孵化： 原肠胚：原肠腔 有三胚层的分化;5.体外受精：有性生殖过程 卵母细胞的采集方法： 从输卵管冲取卵子（可直接受精） 从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞 卵母细胞的培养：减数第二次分裂中期 精子的采集： 假阴道法、手握法和电刺激法 精子获能方法：培养法 化学法（肝素或钙离子载体） 受精：获能溶液或专用的受精溶液中完成受精过程 胚胎的早期培养培养液成分： 无机盐、有机盐、维生素、激素、氨基酸、核苷酸、血清。 当胚胎发育到适宜的阶段时，可将其取出向受体移植或冷冻保存;选择;7.胚胎分割：来自同一胚胎的后代具有相同的遗传物质，属于无性繁殖 胚胎分割时间：桑椹胚或囊胚 操作过程：对囊胚阶段的胚胎要将内细胞团均等分割， 否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。 8.胚胎干细胞（ES或EK细胞） 形态：体积小、细胞核大、核仁明显； 功能：具有发育的全能性，即可分化为成年动物体内 任何一种组织细胞。 体外培养下，ES细胞可以只增殖不分化，可进行冷冻保存，也可进行遗传改造。;感谢您的观看！;内容总结