ABO疑难定型汇总.docxVIP

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A BO 疑难定型 仅供学习与交流,如有侵权请联系网站删除谢谢 仅供学习与交流,如有侵权请联系网站删除谢谢 PAGE 2 精品资料 ABO 疑难定型 一、ABO 疑难血型鉴定的方法 (一)正反定型: 正定型:-A, -B,-AB, -H, -A1 反定型:Ac, Bc, Oc, 自身对照 ABO 正定型中各种试剂用途 疑难定型中正定型用抗血清 抗-A 及抗-B 抗-AB:确认弱A 和弱B 抗原,与弱A 及弱 B 抗原亲和力强,会产生强反应 抗-H:用于检查亚型及孟买型, A 亚型红细胞上的H 抗原多于正常 A 型 抗-A1: 用于A 亚型(如 A2, A3)检测 H 抗原在红细胞上的分布 ABO 反定型中各种试剂的用途 反定型中试剂红细胞的意义 A 及B 细胞: 确认抗-A 或抗-B 抗体 O 型红细胞:检查是否存在ABO 系统以外抗体干扰ABO 反定型 精品资料 精品资料 仅供学习与交流,如有侵权请联系网站删除谢谢 仅供学习与交流,如有侵权请联系网站删除谢谢 PAGE 3 自身对照: 用于确认正反定型结果的有效性,排除自身抗体对定型的干扰(如冷凝集等) A2 细胞: 用于亚型的鉴定, 尤其是在怀疑是A 亚型且又存在抗-A1 抗体的情况下 (二)型物质测定 型物质准备:1~2ml 唾液,沸水煮 10 分钟,离心后得到的上清。 标清的调制:标清用盐水稀释至其效价为 1:16 中和:将 0.5ml 型物质与调制后的标清 0.5ml 等体积混合,室温放置 30 分钟 检测:用 Ac 检测中和后的抗-A, Bc 检测中和后的抗-B. 结果判断:如果抗-A 被中和,则被检者为A 型,如果抗-B 被中和,则被检者为B 型。 (三)吸收放散 吸收用 RBC:盐水洗涤 5 次的被检者压积 RBC 1ml。 吸收用的标准血清 将压积 RBC 和标清按等体积比例混合,在相应的温度条件下(4℃)孵育 1 小时,每隔 15 分钟混匀一 次 用盐水洗涤孵育后的细胞 6 次,得到压积 RBC,加入等量盐水。 56℃水浴震荡 10 分钟,离心获得上清即为放散液。 用标准试剂红细胞检测放散液。 (四)O 型筛选红细胞的应用 抗原组成:三组合细胞,要求必须具备全部的Rh 因子 I: O 型R1R1(CDe/CDe); II:O 型 R2R2(cDE/cDE); III: O 型 rr(cde/cde) 用途: 用于受血者、献血员及孕产妇等的ABO 系统以外不规则抗体的筛选 目的: 在配血之前,有针对性、按比例的去寻找与带有抗体的病人相配合的血 (五)自家冷凝集血样的 ABO 定型 正定型用红细胞的准备: 血样采集后,立即离心,获得压积红细胞 用 37℃温盐水洗涤红细胞 45℃热放散 3 分钟 巯基试剂处理: 破坏IgM 抗体 自家冷凝集血样的 ABO 定型 反定型用血浆或血清的准备 血样采集后放置 4℃冰箱静置 24 小时,使红细胞充分吸收自身冷凝集抗体 用自身红细胞吸收去除自身冷抗体 用 O 型红细胞吸收去除ABO 系统以外的非特异性及特异性抗体 (六)获得性 B 获得性B 及多凝集现象 获得性 B: 肠紊乱及感染病人, 细菌酶影响 A 抗原的受体 肠内壁通透性增加,而后细菌多糖吸附在红细胞表面 仅供学习与交流,如有侵权请联系网站删除谢谢 仅供学习与交流,如有侵权请联系网站删除谢谢 PAGE 5 精品资料 多凝集现象:异常或变形的 RBC 被所有正常人的血清凝集(微生物酶作用暴露或激活膜隐蔽受体多凝集血样中的血清不与自身反应) 获得性B 产生的主要机理 二、ABO 正反定型不符的问题分析 (一)ABO 定型问题经常发生的情况为: 明显缺失应该出现的抗-A 或抗-B: 新生儿血样 免疫缺陷、免疫紊乱 前带现象 血型型物质过多 抗原太弱,常规方法检查不出来,相应血清中无抗体 亚型,反应是混合视野 由于试剂被污染,或试剂中有额外抗体 明显多出抗原(或多出抗体) 亚型,如A2 型可能血清中有抗-A1 精品资料 精品资料 仅供学习与交流,如有侵权请联系网站删除谢谢 仅供学习与交流,如有侵权请联系网站删除谢谢 PAGE 6 自家凝集 获得性B (二)引起 ABO 正反定型不一致的原因分析 技术因素: 试剂贮存不当 使用技术错误 使用错误的试剂 使用污染或失效的试剂 离心速度不当 存在IgM 性质的自家冷抗体 由于自家冷抗体(冷凝集病,CHD)而导致自家溶血的病人,在低于 37℃时血细胞自发凝集,影响正反定型。可用 DTT 或 2-ME 来处理细胞及血清来解除此种IgM 抗体引起的干扰。血清的反定型可在 37℃ 进行,用 O 型红细胞作为对照。 抗原表达弱或缺失: A、B 抗原的表达可在下述情况下被抑制: 白血病 双胞胎 c.H 基因变异 A、B 抗原表达太弱:由于A、

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