实验一 血清蛋白质醋酸纤维素薄膜电泳.docxVIP

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  • 2023-03-15 发布于上海
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实验一 血清蛋白质醋酸纤维素薄膜电泳 【实验目的】 了解电泳的一般原理,掌握醋酸纤维素薄膜电泳操作技术。 测定人血清中各种蛋白质的相对百分含量。 【实验原理】 带电荷的胶体粒子在电场中移动的现象称电泳。醋酸纤维素薄膜电泳法是以醋酸纤维素薄膜作为支持物。 血清中含多种蛋白质,当在pH 这 8.6 时,这些蛋白质均带负电,它们在电场中向阳极移动,由于各种蛋白质所带负电荷多少及颗粒大小不同,所以在同一电场,同一 pH 环境中涌动速度不同。 本实验以醋酸纤维素为电泳支持物,分离各种血清蛋白。血清中含有清蛋白,α~球蛋 白,β~球蛋白,γ~球蛋白和各种脂蛋白等。各种蛋白质由于氨基酸组分,立体构象,分子量,等电点及形状不同,在电场中迁移速度不同。分子量小,等电点低,相同碱性pH。 表 1 人血清中 12 种蛋白质的等电点及分子量 蛋白质名称 等电点(pl) 分子量 清蛋白 4.88 69000 α~球蛋白 5.06 α1—200000 β~球蛋白 5.12 α2—300000 90000—150000 γ~球蛋白 6.85-7.50 156000—30000 缓冲体系中,带负电喝多的蛋白质颗粒在电场中移动速度快。例如,以醋酸纤维素薄膜为支持物,正常人血清中pH=8.6 的缓冲体系中电泳 1h 左右,染色后可显示5 条区带。清 蛋白泳动最快,其余依次为α1~,α2~,β~及γ~球蛋白。这些区带经

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