实验 酪蛋白的制备.docxVIP

实验四 酪蛋白的制备 一、实验目的 1、学习从牛奶中制备酪蛋白的原理和方法。 2、掌握等电点沉淀法提取蛋白质的方法。 二、实验原理 牛乳中的主要的蛋白质是酪蛋白，含量约为35g/L。酪蛋白是一些含磷蛋白质的混合物，精品文档，你值得期待 等电点为 4.7。利用等电点时溶解度最低的原理，将牛乳的 pH 调至 4.7 时，酪蛋白就沉淀出来。用乙醇洗涤沉淀物，除去脂类杂质后便可得到纯酪蛋白。 三、材料、试剂与仪器 材 料 新鲜牛奶 试剂 （1）95%乙醇 1 200mL （2）无水乙醚 1 200mL （3）0.2mol/L pH4.7 醋酸—醋酸钠缓冲液 300ml 先配A 液与B 液 A 液：0.2mol/L 醋酸钠溶液 称 NaAC·3H2O 54.44g，定容至 2000ml。 B 液：0.2mol/L 醋酸溶液，称优 纯醋酸（含量大于 99.8%）12.0g 定容至 1000ml。取A 液 1770ml，B 液 1230ml 混合即得 Ph4.7 的醋酸——醋酸钠缓冲液 3000ml。 （4）乙醇—乙醚混合液 乙醇：乙醚=1 ：1（V/V） 仪器 离心机、抽滤装置、精密pH 试纸或酸度计、电炉、烧杯、温度计 四、操作步骤 酪蛋白的粗提 100mL 牛奶加热至 40℃。在搅拌下慢慢加入预热至40℃、pH4.7 的醋酸缓冲液 100mL. 用精密pH 试纸或酸度计调pH 至4.7。