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精选资料 【实验技术方法】分子生物学技术(zt) 分子生物学技术 真核细胞DNA 的制备与定量|质粒DNA 的碱裂解法提取与纯化|λ噬菌体DNA 提取|DNA分子的限制性内切酶消化|DNA片段回收与纯化|目的基因的亚克隆|PCR|引物参数计算 |PCR产物的克隆|DNA序列测定|Southern 杂交|PCR-SSCP|细胞凋亡|RNA操作中的一般要求|RNA 的制备|mRNA的分离与纯化|RT-PCR|NorthernBlot|RPA|ddPCR|原位杂交|原核表达|蛋白SDS 电 泳|Western|表达蛋白的分离与纯化|表达蛋白的生物学活性的检测|真核转染 真核细胞DNA 的制备与定量 制备基因组 DNA 是进行基因结构和功能研究的重要步骤，通常要求得到的片段的长度不小于 100-200kb。在DNA 提取过程中应尽量避免使DNA 断裂和降解的各种因素，以保证DNA 的完整性， 为后续的实验打下基础。一般真核细胞基因组DNA 有107-9bp，可以从新鲜组织、培养细胞或低 温保存的组织细胞中提取，常是采用在EDTA 以及SDS 等试剂存在下用蛋白酶K 消化细胞，随后 用酚抽提而实现的。这一方法获得的DNA 不仅经酶切后可用于Southern 分析，还可用于PC