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- 2023-03-26 发布于内蒙古
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多倍体诱发及细胞学鉴定实验报告
多倍体诱发是一种常用的细胞诱发技术,它的原理是利用染色质聚集的程序来诱发染色体复制,从而在细胞可分裂的过程中,产生多半数多倍体细胞。多倍体诱发实验一般可以根据实验室不同需求来实施,其原理是通过建立多倍体的染色体数,为研究细胞的生物学和遗传学研究提供学习模型。
本实验中,我们采用405nm(紫外)的扫描激光束,在雪莉2-8(CHO)细胞株中进行多倍体诱发实验。首先,在细胞培养皿中贴满CHO细胞,随后用紫外光照射4秒,以聚集染色质的形式诱导染色体复制。随后,用培养基成功培养多倍体细胞,并经过延续文献内容,其染色体数处于巴氏体期。
之后,我们用下列材料进行了细胞学鉴定,建立了染色体数的真实状况。首先,我们通过原子力显微镜(AFM)观察细胞的外形特征,并观察细胞的表面晶粒; 然后,以可见光成像和三维恒定焦距倒相聚焦显微镜(TIFM),进一步探讨了细胞形态和染色质结构;最后,我们采用GenePaintFISH试剂盒,对样品进行染色体染色,以求知多倍体细胞的染色体数。
经过多倍体诱发实验及细胞学鉴定,我们发现雪莉2-8细胞株有49个染色体,其中染色体I~45有2N(2倍体)、染色体46~48有3N(3倍体)和染色体49有4N(4倍体)的染色体,其中4N染色体的比例和染色体数均与AFM、TIFM和GenePaintFISH鉴定结果相
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