植物细胞工程的理论基础.ppt

第三十页，共六十二页，2022年，8月28日 有变态器官（如鳞茎、球茎、块茎等）的植物，在培养中往往也容易形成相应的变态器官，如百合、水仙等鳞茎类植物培养中往往易形成小鳞茎；马铃薯等块茎植物培养中则可观察到块茎的形成。这一特性也使以变态器官为繁殖体的植物实现实验室工厂化生产种子提供了可能。 第三十一页，共六十二页，2022年，8月28日 2.生长调节剂 生长调节剂在细胞生长与个体发育中具有重要的调控作用。离体培养下的器官分化在大多数情况下是通过外源提供适宜的植物生长调节剂来实现的。 种类、浓度和不同类型生长调节剂的比例是影响根芽等分化的关键。 第三十二页，共六十二页，2022年，8月28日 3.光照 光照有利于维管组织和叶绿体形成进而分化芽 愈伤组织的诱导培养一般是在黑暗或弱光照条件下进行的，细胞中完全没有维管成分，当转入强光照条件下以后，才能逐渐变绿并形成维管组织。 分化培养的初期连续光照能促进愈伤组织变绿，随后的昼夜交替则有利于细胞极性的建立，从而促进器官分化。 有些植物，只有在一定的光周期条件下才能分化芽，如天竺葵的愈伤组织进入器官分化培养，一般要在16h/d光照和8h/d黑暗条件下才能分化芽。 第三十三页，共六十二页，2022年，8月28日 4.温度 愈伤组织诱导培养时，温度可以适当提高，而分化温度比诱导温度要低。如烟草，愈伤组织生长时33℃仍可良好生长，而分化则必需在18℃条件下才适宜。 与光周期相似，某些需要通过低温春化的植物，在离体培养中器官形成有时也需要低温处理，特别时对于某些特殊目的的培养，需要考虑这一因素，如菊苣根培养产生的愈伤组织，诱导分化时经低温处理可形成花芽，而在25℃下培养只能形成营养芽。 第三十四页，共六十二页，2022年，8月28日 §3.离体培养下的遗传与变异 一、培养细胞变异的类型 二、变异原因 三、影响离体培养细胞遗传变异的因子 四、体细胞无性系变异的诱导 五、优良变异的筛选方法 六、体细胞无性系变异的利用 七、变异的抑制 第三十五页，共六十二页，2022年，8月28日 一、培养细胞变异的类型 离体培养中，组织、细胞、原生质体培养再生植株中，会有各种各样的变异。例如，叶色、花色的变异，株高、果实大小的变异，染色体结构和数目的变异，由于离体培养条件下并没有发生雌雄配子的重组和交换。 由于它们没有发生有性过程，因此，我们把在组织培养条件下所表现的遗传与变异特征称之为体细胞遗传与变异，由此发展起来的遗传学分枝称为体细胞遗传学。 第三十六页，共六十二页，2022年，8月28日 培养细胞变异的类型1、自发产生的变异，即培养物在未加诱变因素的情况下产生变异。2、诱发产生的变异，即培养物在诱变因素作用下产生变异。 前者变异率一般在10-7~10-6之间，后者一般在10-5~10-4。  第三十七页，共六十二页，2022年，8月28日 1、自发产生的变异 A.染色体多倍性和非整倍性 第三十八页，共六十二页，2022年，8月28日 B.畸形变异 最常见的变异是白化苗突变，其次是产生丛生芽、肉质茎芽等。 第三十九页，共六十二页，2022年，8月28日 第四十页，共六十二页，2022年，8月28日 ????????????????????????????????????????????????????????????? 安祖花 第四十一页，共六十二页，2022年，8月28日 C.非遗传变异 a、外遗传变异（epigenetic variation) 在植物愈伤组织培养过程中，常常出现一种不涉及基因结构的变化，而只是在基因表达水平上的变异，如最常见的生长素自养型变异。这种变异不能通过有性世代传递给后代植株，但在离体条件下却可以经过培养继代，长期保存。（马铃薯） 第四十二页，共六十二页，2022年，8月28日 b、生理适应（physiologic adaptation）变异 通常是在某种外界条件存在时才表现出变异，外界条件不存在时，变异也随之消失 第四十三页，共六十二页，2022年，8月28日 2、诱发产生的变异（抗镰刀菌毒素细胞变异系的分离）将诱导产生的愈伤组织接种在含不同浓度梯度毒素的培养基上筛选得到半致死剂量浓度、100%生长抑制生长浓度、 致死计量浓度以半致死剂量为最低浓度，逐代增加毒素浓度至致死剂量浓度 转移至无毒素培养基继代培养两代转移到致死剂量和高于致死剂量的培养基培养，统计存活率 第四十四页，共六十二页，2022年，8月28日 第一页，共六十二页，2022年，8月28日 §1.细胞分化和全能性 一. 细胞全能性的一般概念 二.细胞分化 三.离体培养中细胞的脱分化、再分化 第二页，共六十二