罗氏TPO检测说明.docxVIP

发布部门：核医学科实验室 编制人：周远洋 审核人：施 鸣 批准人：陈载融 甲状腺过氧化物酶抗体（TPO） 的检测 文件编号：NM-LAB-SOP-LS-019 发布日期：2020-07-01 生效日期：2020-07-01 版 本：B/0 第 PAGE 1页，共5页 检验目的 使用罗氏cobas e801全自动电化学发光分析仪进行血清中甲状腺过氧化物酶抗体A-TPO的定量测定。规范操作，保证测定准确。 检验程序的原理和方法 Anti-TPO测定采用竞争法原理， 12 μl 标本与钌（Ru）标记的抗TPO抗体混匀。加入生物素化的TPO和链霉亲和素包被的微粒，标本中的抗TPO抗体与钌（Ru）标记的抗TPO抗体竞争生物素化的TPO抗原上的结合部位。形成的复合物通过生物素、链酶亲和素之间的反应结合到微粒上。反应混和液吸到测量池中，微粒通过磁铁吸附到电极上，未结合的物质被清洗液洗去，电极加电压后产生化学发光，用光电倍增管进行测定。通过检测仪的校准曲线得到最后检测结果，定标曲线是通过2点定标和cobas link获得的一级定标曲线生成的。 性能特征 3.1 测量准确度：回收率在90-110%之内。 3.2 测量精密度：参照甲状腺功能其他项目，符合小于行业标准的1/4总误差要求，认为A-TPO精密度符合精密度要求。 3.3 分析测量范围：9-600 IU/mL 3.4 LOD:9 IU/mL 样品类型 血清：按标准常规方法采集。仪器检测用量10μl。 标本在2-8oC可稳定30天，-20oC可稳定3个月。不要使用加热灭活的标本。标本和质控品禁用叠氮钠防腐。 标本、定标液和质控品在测定前应预温到室温。 患者准备 受检者的准备：病人避免采血前剧烈活动。注意事项遵医嘱及NM-LAB-CJ《标本采集手册》。 对于接受高剂量生物素治疗的患者（即 5 mg/天）， 必须在末次生物素治疗后至少8小时采集样本。类风湿因子浓度小于等于1000 IU/mL时无明显干扰。AMH浓度小于等于9996 pmol/L（1400 ng/mL） 时无高剂量钩状效应。 药品 体外对20种常用药物进行检测。 当小于等于下表所示浓度时，未发现有药物影响检测结果。 注意事项 防止溶血脂血：混匀时不可用力震荡，避免产生大量气泡，应尽量空腹和避免在输入脂肪乳过程中或其后采血。 避免淤血：止血带压迫时间不宜过长，最好不超过1分钟。 标本不能从输液管中或输液手的同侧静脉采集。 穿刺时须防止穿刺针刺扎采血员，以避免血液中传染性病原如肝炎病毒、人类免疫缺陷病毒等以及血液中未知的可致病成分污染采血员。 抗凝管应贴有条形码或标签，并清楚注明病人姓名。 容器和添加剂类型 容器：美国BD真空采血管。 添加剂类型：真空管内均匀喷涂促凝胶，管底附惰性分离胶。 所需的仪器和试剂 检测仪器 罗氏公司生产Cobas e801全自动电化学发光免疫自动分析仪。 采用罗氏原装配套试剂。 试剂： M：链霉亲和素包被的微粒，1瓶，13.2mL。粒子浓度0.72mg/mL。含防腐剂。 R1：钌标记的AntiTPO抗体，1瓶，18.8mL，浓度1mg/L，tris缓冲液100mmol/L，pH7.2。含防腐剂。 R2：生物素化的TPO，1瓶，19.7mL。浓度0.15mg/L，tris缓冲液30mmol/L，pH 7.0。含防腐剂。 校准品： Elecsys TPO CalSet 货号见试剂盒。 其他所需材料： Elecsys 系统清洗液（SysClean），货号11298500316 Elecsys 系统缓冲液 （ProCell M），货号06908799190 Elecsys 检测池洗液（CleanCell M），货号04880293190 Elecsys PC/CC杯，货号07485409001 Elecsys 预清洗液（PreClean II M），货号06908853190， Elecsys 反应杯/加针头/废物袋（CUP/TIP），货号05694302001 Elecsys LFC Cup，货号07485425001 Elecsys Prewash LFC Cup，货号07485433001 环境和安全控制 8.1.1 温度：18-32℃，温度的改变应该小于2℃/小时，屋内湿度：30%-80%。 无尘良好通风的环境，无直接日照。 8.1.2 电源要求：输入电压220V（+/- 10％）50HZ，有良好接地的电源，单独接地线，对地阻抗小于10Ω，零地电压小于2V,仪器功率11KVA，建议UPS功率大于15KVA。 8.1.3 其他要求：避免阳光直射，勿近无线电或其他通讯设备，通风需良好。 8.1.4 供水要求：无菌去离子水(要求10 cfu/mL，电导率≤1μS/cm), 水量: