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微生物学复习资料--第1页 微生物学复习资料 -CAL-FENGHAI.Network Information Technology Company.2020YEAR 微生物学复习资料--第1页 微生物学复习资料--第2页 微生物学中的一些问题 第2章纯培养 1.冷冻真空干燥保藏、液氮保藏法是目前使用最普遍、最重要的微生物保藏 方法，大多数专业的菌种保藏机构均采用这两种方法作为主要的微生物保存手 段。（ T ） 2.如果要从环境中分离得到能利用对氨基苯乙酸/ 以2，4-D 作为唯一碳源和能 源的微生物纯培养物，你该如何设计实验 从对氨基苯乙酸/2，4-D 含量较高的环境中采集土样或水样; 配制仅以对氨基苯乙酸//2，4-D 作为唯一碳源培养基，进行增殖培养; 配制培养基，制备平板，一种仅以对氨基苯乙酸/2，4-D 作为唯一碳源(A)，另 一种不含任何碳源作为对照(B) ; 将样品适当稀释(十倍稀释法)，涂布A 平板;将平板置于适当温度条件下培 养，观察是否有菌落产生; 将A 平板上的菌落编号并分别转接至B 平板，置于相同温度条件下培养(在B 平板上生长的菌落是可利用空气中CO2 的自养型微生物) ; 挑取在A 平板上生长而不在B 平板上生长的菌落，在一个新的A 平板上划 线、培养，获得单菌落，初步确定为可利用对氨基苯乙酸/2，4-D 作为碳源和能 源的微生物纯培养物。 第3章结构 1．革兰氏阳性细菌细胞壁的肽聚糖单体由（1）双糖单位 （2 ）四肽尾 （3 ） 肽间桥三部分组成。 2.大肠杆菌与金黄色葡萄球菌在细胞壁的组成与结构上的差别. 组成上的差别：大肠杆菌（革兰氏阴性菌）：肽聚糖含量低；无磷壁酸；类 脂质含量高；蛋白质含量高。金黄色葡萄球菌（革兰氏阳性菌）：肽聚糖含量 很高；磷壁酸含量很高；无类脂质；无蛋白质。 结构差别：大肠杆菌：肽聚糖：四肽尾是“L 丙氨酸—D 谷氨酸—L 赖氨酸— D 丙氨酸”）；甘氨酸五肽桥；厚度大；交联度大。金黄色葡萄球菌：四肽尾 是“L 丙氨酸—D 谷氨酸—mDPA—D 丙氨酸”；无特殊肽桥；厚度小；交联度 小。 3.肽聚糖种类的多样性主要反映在_A_结构的多样性上。 A 肽桥 B 粘肽 C 双糖单位 D 四肽尾 4. 革兰氏染色法的分子机制是什么，基本操作步骤，哪一步是关键步骤； G+ 菌：细胞壁厚，肽聚糖含量高，交联度大，当乙醇脱色时，肽聚糖因脱水而 孔径缩小，故结晶紫-碘复合物被阻留在细胞内，细胞不能被酒精脱色，仍呈紫 色。 G ˉ菌：肽聚糖层薄，交联松散，乙醇脱色不能使其结构收缩，因其含脂量高, 乙醇将脂溶解，缝隙加大，结晶紫-碘复合物溶出细胞壁，酒精将细胞脱色，细 胞无色，沙黄复染后呈红色 2 微生物学复习资料--第2页 微生物学复习资料--第3页 革兰氏染色法的操作步骤：第一步：结晶紫初染；第二步：碘液媒染；第三 步：酒精脱色;第四步：沙黄复染。其中关键步骤：酒精脱色。 5.溶菌酶与青霉素对细菌细胞壁作用的异同:溶菌酶主要通过破坏细胞壁中的 N-乙酰胞壁酸和N-乙酰氨基葡糖之间的β-1,4糖苷键，使细胞壁不溶性黏多糖分 解成可溶性糖肽，导致细胞壁破裂内容物逸出而使细菌溶解。水解肽聚糖双糖 单位中的β－1，4 －糖苷键，导致细菌因细胞壁肽聚糖的“散架”而死亡。青 霉素抑制繁殖期细菌细胞壁的合成而发挥杀菌作用，起效迅速。作用于肽聚糖 肽桥的联结，即抑制肽聚糖的合成，故仅对生长