革兰氏染色的机理和步骤(范本模板).docx

1.革兰氏染色的机理和步骤 机理：G+、G—主要由其 CW 化学成分的差异而引起对乙醇的通透性， 抗脱色能力的差异。主要有肽聚糖的厚度和结构所决定. G+的 CW：肽聚糖层厚，脂质含量低。乙醇脱色时 CW 脱水,孔径减 少，透性降低，不易脱色，呈初染得蓝紫色。 G- 的 CW:肽聚糖层薄,脂质含量高. 乙醇脱色时,类脂被乙醇溶解， 透性 升高，细胞被复染显红色。 步骤： ①涂片：在干净的载玻片上滴一滴水，用接种环挑取菌体均匀 涂布于水中. ②固定：将玻片靠近酒精灯火焰，蒸干水分,但不要烤焦。 ③初染：用碱性颜料结晶紫对菌液涂片进行初染。 ④媒染: 以碘液媒染 1min,水洗,吸干水分。(细胞内形成结晶紫 与碘的复合物，增强相互作用) ⑤脱色 (关键步骤)： 以 95％的乙醇脱色 30s，应适当振荡均 匀， 是乙醇脱色完全。 ⑥水洗，吸干。 ⑦复染： ？?(第 2 张) 复染 30s，水洗吸干。 ⑧干燥镜检. 2、用渗透皮层膨胀学说解说芽孢耐热机制。 芽孢的耐热性在于芽孢衣对多价阳离子和水分的透性很差， 以及 皮层的离子强度很高，这就使皮层产生了极高的渗透压去夺取芽孢核 心中水分， 其结果造成皮层的充分膨胀和核心的高度失水， 正是这种 失水的核心才赋予芽孢极强的耐热性。 3、引起微生物培养过程中 PH 变化的几种可能反应，并说明如何能 够维持微培 PH 稳定。 答：培养过程中，由于