分子生物学订正.pdfVIP

2 简述第二代测序技术的原理和应用。 第二代测序技术即焦磷酸测序技术，该技术无须进行电泳，DNA 片段也无须荧光标记， 操作极为简便。其原理为：第1 步：1 个特异性的测序引物和单链DNA 模板结合，然后加 入酶混合物(包括DNA Polymerase、ATP Sulfurylase、Luciferase 和Apyrase)和底物混合物(包 括APS 和Luciferin)；第2 步：向反应体系中加入1 种dNTP，如果它刚好能和DNA 模板的 下一个碱基配对，则会在DNA 聚合酶的作用下，添加到测序引物的3’末端，同时释放出一 个分子的焦磷酸(P