(51)--9.2.2载体临床分子生物学检验技术.pptVIP

分子克隆的工具：常用载体 载体（vector）：携带靶DNA（目的DNA）片段进入宿主细胞进行扩增和表达的运载工具。其化学本质为DNA 。常用的载体主要有： 质粒载体、噬菌体载体、病毒载体和人工染色体等。 发展历史第一阶段：1977年前，天然质粒和重组质粒的利用，如pSC101、colE1、pCR、pBR313和pBR322。天然质粒，没有经过以基因克隆为目的的改造 pSC101 Stanley Cohen巴拿马沙门氏菌 Salmonella panama四环素抗性（Tetr）?EcoR I拷贝数低 第二阶段：增大载体容量（降低载体长度），建立多克隆位点区和新的遗传标记基因。如pUC系列载体。第三阶段：完善载体功能以满足基因工程克隆中的不同要求，如M13mp系列载体，含T3，T7，sp6启动子载体，表达型载体及各种探针型载体。 受体细胞结构插入片断举例 质粒E.coli环状〈 8 kbpUC18/19 , T-载体pGEM- 3z等 λ噬菌体E.coli线状9 - 24kbEMBL系列丝状噬菌体及噬菌粒E.coli环状〈 10 kbM13mp系列粘粒载体E.coli环状35- 45kbpJB8,c2RB, pcoslEMBL, pWE15/16, pCV BAC (Bacterial Ar