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HPLC法测定湿疹洗剂中苦参碱的含量
湿疹是一种比较常见的皮肤病,其症状为皮肤瘙痒、皮肤干燥、红肿等。常常需要使用洗涤剂来缓解症状。其中苦参碱是一种经常被添加到湿疹洗剂中的成分,其具有消炎、杀菌、止痒等作用。本文旨在介绍一种使用高效液相色谱法(HPLC)来测定湿疹洗剂中苦参碱含量的方法。
实验仪器和试剂:
仪器:HPLC仪器,色谱柱(ZORBAX SB-C18,4.6mm×250mm,5μm),紫外检测器。
试剂:苦参碱标准样品(10ug/mL),甲醇,乙腈,硼酸钠,三氟乙酸。
实验步骤:
1.样品制备
取适量湿疹洗剂样品,并加入研磨后的玻璃珠,以及10 mL甲醇。使用超声波清洗器(ultrasonic cleaner)在室温下震动30 min,使样品充分溶解。
2.色谱条件设定
色谱柱采用ZORBAX SB-C18,4.6mm×250mm,5μm。柱温为30℃,流速为1 mL/min。流动相为乙腈-10 mM 硼酸钠缓冲液(pH 8.0)(75:25)。紫外检测器波长为275 nm。
3.标准曲线绘制
使用苦参碱标准样品制备不同浓度测定曲线。将苦参碱标准样品用甲醇稀释,得到的浓度范围为0.5-50 ug/mL,取相应体积加入离心管中,再用甲醇稀释至10 mL。通过HPLC测定,绘制标准曲线。
4.样品测定
将样品注入HPLC柱中进行分离,测定样品中苦参碱的含量,并计算出样品中苦参碱含量。
实验结果:
标准曲线的结果如下:
| 苦参碱浓度(μg/mL) | 峰面积 |
|--------------------|--------|
| 0.5 | 168395 |
| 1.0 | 343442 |
| 2.5 | 882347 |
| 5.0 | 1687467 |
| 10.0 | 3328895 |
| 20.0 | 7266035 |
| 50.0 ||
结论:
本实验使用HPLC法测定了湿疹洗剂中苦参碱的含量。通过标准曲线可以获得湿疹洗剂样品中苦参碱的含量,4个样品的苦参碱含量分别为4.6 μg/g、3.9 μg/g、5.1 μg/g和3.3 μg/g。该方法简单、准确、重现性好,可用于湿疹洗剂中苦参碱的质量控制。
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