DB15T 1588-2019元宝枫组织培养育苗技术规程.pdfVIP

ICS 65.020.20 B 05 DB15 内 蒙 古 自 治 区 地 方 标 准 DB15/T 1588—2019 元宝枫组织培养育苗技术规程 Technical Regulation for Tissue Culture of Acer Truncatum Bunge 2019-01-18 发布 2019-04-18 实施 内蒙古自治区市场监督管理局 发 布 目 次 前言 II 1 范围 1 2 规范性引用文件 1 3 术语和定义 1 4 环境及器具灭菌 1 5 培养基配制 2 6 外植体及其灭菌 3 7 初代培养 4 8 增殖继代培养 4 9 生根培养 4 10 炼苗移栽 5 附录A （资料性附录） MS 培养基母液配制表 7 表A.1 MS 培养基母液配制表 7 附录B （资料性附录） 常用植物生长物质的母液配置 8 表B.1 常用植物生长物质的母液配置 8 前 言 本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。 本标准由内蒙古自治区林业和草原局提出并归口。 本标准起草单位：内蒙古和盛生态科技研究院有限公司、内蒙古农业大学、内蒙古和盛生态育林有 限公司、北京蒙树生态环境工程有限公司、赤峰市园林管理局。 本标准主要起草人：赵泉胜、赵鹏武、铁英、封卫平、斯琴毕力格、王娟、田菊、王淑杰。 元宝枫组织培养育苗技术规程 1 范围 本标准规定了元宝枫组织培养的术语和定义、环境及器具灭菌、培养基配制、外植体及其灭菌、初 代培养、增殖继代培养、生根培养、组培苗炼苗移栽等基本内容及技术要求。 本标准适用于元宝枫组织培养技术生产。 2 规范性引用文件 下列文件对本文的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。 凡是不注日期的引用文件，其最新版（包括所有的修改单）适用于本文件。 LY/T 1882 林木组织培养育苗技术规程 3 术语和定义 LY/T 1882-2010界定的及下列术语和定义适用于本文件。 3.1 组培瓶苗 tissue-culture container seedling 经组织培养形成、尚未出瓶（试管）的完整植株。 3.2 过滤灭菌 filter sterilization 对不耐高温的植物生长调节物质，采用孔径小于0.45 μ m 的滤网膜过滤消除杂菌的方法。 4 环境及器具灭菌 4.1 准备室消毒灭菌 经常用消毒液消毒，保持室内清洁。 4.2 接种室消毒灭菌 保持室内清洁。接种前用紫外灯照射30 min～40 min，关闭紫外灯20 min后方可进入。 4.3 培养室消毒灭菌 经常用消毒液对地面、组培架等设施进行消毒。 4.4 超净工作台消毒灭菌 接种前应用紫外灯照射30 min～40 min，无菌风吹40 min以上。然后用70%酒精喷洒台面及操作台 内部空间。定期清洗超净工作台的过滤膜以确保过滤膜清洁，具体方法：摘下滤膜，使用流水冲洗干净， 晾干，安装，紫外灯照射灭菌。 4.5 器具消毒灭菌 4.5.1 接种器具消毒灭菌 接种前，将接种工具用滤纸包好，置于高压灭菌锅灭菌，要求温度121 ℃、时间30 min。使用前用 酒精灯外焰灼烧20 s以上，或用接种工具灭菌器直接灭菌。 4.5.2 污染瓶消毒灭菌 用高压灭菌锅消毒，然后再清洗培养瓶。或者用75%乙醇灭菌后再清洗培养瓶。 5 培养基配制 5.1 基本培养基的选择 选择MS培养基为基本培养基。 5.2 母液的配制和保存 5.2.1 母液的配制 母液中的大量元素、铁盐、微量元素及有机成分（甘氨酸、叶酸）混合配制，肌醇单一配制，具体 参数见附录A；植物