高级组织学课件生殖辅助技术XXXX级硕士研究生read.ppt

生殖辅助技术;生育是人类的基本生理功能，是人类的一种本能。;;一、男性生育能力明显下降; 张树成等人得出了触目惊心的结论：男性精液质量明显下降。其中以精子数目的降低最为明显，降低40%以上，精子活动率降低8.4%；精子正常形态降低了7.3%；精液量降低了4.9%。;为什么男性的生育力竟下降得这么厉害？;;生殖辅助技术：;人工授精;人工授精的适应症;;人工授精实施要素：;人工授精的方法：;二、男性精子的准备 新鲜精液： 冻存精子的准备： 精子的洗涤;方法：;供精人工授精;（一）女方条件;（二）供精者条件;（三）供精者的筛选程序 ;;（四）实验室检查;（五）供精者知情同意书 ;;（六）捐精流程 ;（七）AID方法;体外授精和胚胎移植（in vitro fertilization and embryo transfer）;（一）适应症; ;; ;; ; ;IVF;;;代孕母亲（卫生部暂禁）;胚胎冷冻;显微操作技术;;机械法PZD;显微操作辅助受精;ICSI受精的生物学特点：;适应症 严重少精症 弱畸精症 少弱畸精症 无精症（阻塞性及非阻塞性） 以往IVF时卵母细胞均不受精或受精率低下 其他：;ICSI的禁忌症;ICSI 的技术操作;;MESA及附睾精子; 睾丸取精：主要适用于非阻塞性无精症，切取一小块睾丸组织的 方法获取精子或精子细胞（开放式活检）。也可用细针组织抽吸睾丸活检法。;活检枪及抽吸法睾丸取精;卵子的来源与处理 卵子一般在促超排卵后,经阴道B超介导,用16G或17G穿刺针经阴道获取。 取卵后4小时，进行去卵丘结构处理。; 设备； 显微操作皿的准备； 显微注射； 精子制动与获取； 固定卵子与注射；;设 备;ICSI示意图;ICSI操作过程;ICSI过程(A);ICSI过程(B);注射15-18小时后，检查是否受精（ICSI 后精卵结合过程一般较正常为快，6小时内33%可出现原核，8-20小时89%-91% 出现原核）。 受精卵继续培养24小时，观察有无卵裂,然后经阴道移植3-4个质量优良的胚胎。 剩余胚胎冷冻保存。;;;ICSI妊娠的后代随访;辅助“破壳”;辅助孵出(AH);;种植前遗传学诊断;1. PGD的指征: ;夫妇中任何一方或双方有染色体核型异常(数目及结构异常)； 习惯性流产患者； 不孕夫妇中一方或双方患??已明确为基因突变所致疾病(单基因遗传病)，或为携带者，或有家族史者，如染色体显性遗 传病； 染色体微缺失综合征； 与精子发生相关的染色体微缺失。 ;2. PGD的方法;取卵裂球过程;卵裂球活检;;聚合酶链反应(PCR)： 单细胞PCR、巢式PCR、半巢式PCR，结合 (linkage)PCR，荧光PCR等。 PCR的扩增成功率在90%以上，个别71%，极体66.1%左右。 PCR的优点：需要样本量少，快速。;荧光原位杂交 (Fluorescence in situ hybridization ， FISH) 固定，特异探针(已标上荧光素)去杂交标记物，荧光显微镜下观察有无发出不同颜色荧光的亮点及数目以了解该极体/ 细胞是否正常。 人类22种常染色体及X，Y染色体的探针均已商品化 针对许多致病基因，基因突变位点的探针也已商品化。 自行制备针对某一患者的特异探针。 一次最多可杂交5-7种探针(不同颜色)。 重复FISH的方法， 常检测X,Y,1,5,7,8,11,13,16,18,21,22号等较常发生异常的染色体。;4. PGD发展评估及展望;PGD发展相对缓慢的原因，与ICSI比较 PCR、FISH等方法的局限，嵌合体诊断困 难，早期胚胎细胞数量减少，极体PGD的局限。 大众对PGD的看法与接受程度。 相应的法律、法规。 PGD发展形势喜人。 PGD与围产诊断的互补和相辅相成。;卵浆置换生殖辅助技术;生育是人类的基本生理功能，是人类的一种本能。;;一、男性生育能力明显下降; 张树成等人得出了触目惊心的结论：男性精液质量明显下降。其中以精子数目的降低最为明显，降低40%以上，精子活动率降低8.4%；精子正常形态降低了7.3%；精液量降低了4.9%。;为什么男性的生育力竟下降得这么厉害？;;生殖辅助技术：;人工授精;人工授精的适应症;;人工授精实施要素：;人工授精的方法：;二、男性精子的准备 新鲜精液： 冻存精子的准备： 精子的洗涤;方法：;供精人工授精;（一）女方条件;（二）供精者条件;（三）供精者的筛选程序 ;;（四）实验室检查;（五）供精者知情同意书 ;;（六）捐精流程 ;（七）AID方法;体外授精和胚胎移植（in vitro fertilization and embryo transfer）;（一）适应症; ;; ;; ; ;IVF;;;代孕母亲（卫生部暂禁）