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- 约 28页
- 2023-05-01 发布于河北
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动物微生物及免疫基础; 基本概念;消毒:指用物理或化学方法杀灭物体上病原微生物的方法,仅要求达到消除传染性的目的,而对非病原微生物及芽胞、孢子并不要求全部杀死。用于消毒的化学物质称为消毒剂或杀菌剂。;防腐:利用化学药品或其他方法抑制或阻止微生物繁殖与发育的方法。所使用的化学药物称为防腐剂。;无菌:意为不存在活的微生物。采取防止或杜绝任何病原性或非病原微生物进入动物机体或其他物体的方法,称为无菌法。以无菌法进行的操作称为无菌操作。
;抑菌作用:指某些物质或因素具有阻碍微生物生长繁殖的作用,即抑菌作用。
;杀菌作用:指某些物质或因素具有杀灭微生物的作用
抗菌作用:指某些药物或因素具有抑制或杀灭微生物的作用。
过滤除菌:指通过过滤作用除去液体或空气中存在的细菌的方法。
;物理因素对微生物的影响; ; 一、温度因素对微生物的影响
1、生长温度范围:腐生菌广 病原菌窄。;2、高温杀菌原理:高温使菌体变性或凝固,酶失去生物学活性,而使细菌灭亡。
A:干热灭菌法:
火焰灭菌
热空气灭菌法 160-180℃,2h
;电热恒温干燥箱; B:湿热灭菌法
煮沸灭菌:100℃ 10-20分钟 加入1%Na2CO3 2-5%石炭酸
适用于外科手术器械,注射器针头等。
流通蒸汽灭菌:100℃ 30分可杀死细菌繁殖体,但不能杀灭芽胞。
间歇灭菌法:利用反复多次的流通蒸汽,以达到灭菌的目的。100℃的蒸汽30min,将被灭菌物品放于37℃温箱3~4小时或过夜,第二天再100℃蒸30min,如此连续3d。用于易被高温破坏的物品 ,如糖培养基。
;巴氏消毒法:利用热力杀死液体中的病原菌或一般的杂菌,
可杀灭液态食品中的病原菌或特定微生物,而不严重破坏其
营养成分和风味。
63-65℃ 30min 杀死总细菌90%,全部病原菌。
71-72℃ 15-30s
132℃ 保持1-2s
?适用范围:鲜乳、果汁、葡萄酒等食品。
;高压蒸汽灭菌法:
?条件和效果:0.105MPa、121.3℃、15~30min
完全灭菌
?所用仪器:高压蒸汽灭菌器
?适用范围:耐高温、高压、不怕潮湿的物品
eg.普通培养基、金属??械、工作服。
;高压蒸汽灭菌器使用注意事项; 2、低温保存菌种:?
原理:菌种保藏主要是根据微生物的生理、生化特点,人为地创造一个微环境条件,设法使微生物菌种的代谢活动处于不活泼和生长繁殖受抑制的休眠状态。这种微环境主要是使菌种长期处于低温、干燥、无氧、避光、缺乏营养以及添加保护剂或中和剂等状态中。微生物菌种在这种极端条件下,很少会发生变异,从而达到保保持其纯而不死、壮而不衰的良好性状。
; 菌种保藏的方法 :
斜面低温保藏法:将各类微生物的菌种接种在不同成分的适宜斜面培养基上,至静止期或产生成熟的孢子时置4℃左右的冰箱中保藏。每隔一定时间,一般5~15天或1~4个月重新移植一次。
甘油保藏法:将20%(也可以用10%)的甘油灭菌后置于装有菌种保存管内。 -20℃或-70℃保存。
;液氮超低温保藏法:简称液氮保藏法或液氮法。它是以甘油、二甲基亚砜等作为保护剂,在液氮超低温(-196℃)下保藏的方法。此法操作简便、高效、保藏期一般可达到15年以上,是目前被公认的最有效的菌种长期保藏技术之一。要使用菌种时,从液氮罐中取出安瓿瓶,并迅速放到35~40℃温水中,使之冰冻熔化。?;真空冷冻干燥保藏法:真空冷冻干燥保藏法又称冷冻干燥保藏法,简称冻干法。它通常是用保护剂制备拟保藏菌种的细胞悬液或孢子悬液于安瓿管中,再在低温下快速将含菌样冻结,并减压抽真空,使水升华将样品脱水干燥,形成完全干燥的固体菌块。并在真空条件下立即融封,造成无氧真空环境,最后置于低温下,使微生物处于休眠状态,而得以长期保藏。常用的保护剂有脱脂牛奶、血清、淀粉、葡聚糖等高分子物质。?; 二、辐射对微生物的影响
; 二、辐射对微生物的影响
2、日光
细菌在直射阳光下数分钟-数小时
eg.炭疽芽胞20小时
紫外线:136nm~400nm
253.7nm(紫外线杀菌灯)
紫外线消毒:仅限于照射物体的表面
工作室、手术室; 二、辐射对微生物的影响
; 三、超声波对微生物的影响; 四、过滤除菌; 五、干燥的影响
干燥使微生物代谢会发生障碍,生长繁殖受阻,还可引起
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