分子生物学与基因工程.pptxVIP

分子生物学与基因工程;第一讲 绪论;主 要 内 容; 生物学经历了一个漫长的研究历程。最早人们从研究动物和植物的形态、解剖和分类开始，随着细胞学、遗传学、微生物学、生理学、生物化学的发展，研究进入细胞水平。到20世纪中叶以来，生物学以生物大分子为研究目标，分子生物学（Molecular Biology）开始形成了独立的学科，这是对生物界的认识不断深入的过程。;第5页/共33页; 从广义来讲，蛋白质及核酸等生物大分子结构和功能的研究都属于分子生物学的范畴，也就是从分子水平阐明生命现象和生物学规律。例如，蛋白质的结构、运动和功能，酶的作用机理和动力学，膜蛋白结构与功能及跨膜运输等都属于分子生物学的研究内容。; 从狭义上讲，分子生物学主要是研究生物体主要遗传物质-基因或DNA的结构及其复制、转录、表达和调节控制等过程的科学。当然，也涉及到与这些过程有关的蛋白质和酶的结构与功能的研究。; 基因工程是指将一种或多种生物体 (共体) 的基因或基因组提取出来, 或者人工合成的基因, 按照人们的愿望, 进行严密的设计, 经过体外加工重组, 通过一定的方法, 转移到另一种生物体 (受体) 的细胞内, 使之能在受体细胞遗传并获得新的遗传性状的技术。;2 分子生物学与基因工程发展简史; 1958年， Crick提出了遗传信息的传递规律，即著名的“中心法则”； 同年， Meselson与Stahl 用实验证明了DNA复制是一种半保留复制； 1959年，Uchoa发现了细菌的多核苷酸磷酸化酶，成功地合成了RNA，研究并重建了将基因内的遗传信息通过RNA中间体翻译成蛋白质的过程； 1961年， Nirenberg和Matthaei破译了所有三联体密码子； 同年，法国科学家Jacob和Monod提出了著名的乳糖操纵子模型；; 1962年，Arber首次发现DNA限制性内切酶的存在； 1970年， Smith首次从大肠杆菌中分离到第一个限制性内切酶；同年，Temin和Baltimore首次发现在病毒中存在以RNA为模板，逆转录成DNA的逆转录酶； 1972年，Berg构建了世界上第一个重组DNA分子，开辟了生物学新领域-遗传工程； 1977年，Robert和Sharp在研究腺病毒的mRNA合成时，首次发现了断裂基因的存在； 1977年， Sanger和Gilbert分别提出了两种DNA测序技术-酶法（或双脱氧链终止法）和化学修饰法；; 1981年，Cech和Altman首次发现RNA具有生物催化功能； 1983年，Mullis发明了聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction，PCR）技术，极大地推动了分子生物学的发展； 1990年，人类基因组计划启动，同时先后开展多种模式生物的基因组测序。标志着生命科学研究进入“基因组学”时代； 1994年，Wilkins和Williams等首次提出了蛋白质组的概念； 1997年，Wilmut等首次成功地从体细胞中克隆出羊-Dolly； 到目前为止，人们已完成包括人和水稻等重要模式生物的基因组测序工作。生命科学研究进入“蛋白质组学”的新的发展阶段。;;人 名;人 名;人 名;人 名;3 .1 分子生物学的研究内容;基因工程研究的主要内容 克隆载体研究: cloning vector 受体系统的研究: host cell system 目的基因的研究: target gene 生物基因组学的研究: genomic research 应用研究: application ;基因工程的基本操作程序 分离获得目的基因 限制性核酸内切酶将切割外源DNA和载体 DNA连接酶将外源DNA和载体连接，组成重组DNA分子。 将重组DNA分子引入受体细胞 带有重组体的细胞培养扩增，获得大量的细胞繁殖群体 筛选和鉴定转化细胞 进一步研究分析，实现功能蛋白的表达;发育生物学与分子生物学的关系 许多发育相关基因纷纷克隆成功，如控制果蝇体节发育的Homeo基因、金鱼草的的花瓣发育基因DEF等。 上述基因的克隆已开辟了发育分子生物学的崭新研究领域，并在近年来获得较大进展。; 在植物生理学方面光合作用的研究已进入分子水平。一些植物的叶绿体DNA的全序列测定已经完成，光合作用有关的基因如光系统I和II、电子传递链、二磷酸核酮糖羧化/加氧酶等的表达调控研究都已基本完成，使光合作用研究进入了一个新的