几种重要微生物药物的发酵工艺.pptxVIP

几种重要微生物药物的发酵工艺第1页/共39页 2第一节 青霉素发酵工艺一、概述1、青霉素是一族抗生素的总称，是由不同的菌种或在不同的条件下所获得的同一类化学物质。 通常所指的青霉素即指苄青霉素（青霉素G），其疗效最好，应用最广泛。 青霉素性质； 是一种游离酸，易溶于有机溶解，难溶于水；青霉素金属盐易溶于水；具有一定的吸湿性，其钠盐吸湿性较弱；固体青霉素稳定，水溶液不稳定。2、使用 对象：大多数G+细菌，部分G-细菌，各种螺旋体及部分放线菌； 注意：易引起过敏，故使用前需皮试。揭阳职业技术学院Jieyang vocantionaltechnical college第2页/共39页 3揭阳职业技术学院Jieyang vocantionaltechnical college第3页/共39页 4二、青霉素发酵工艺及过程1、菌种 揭阳职业技术学院Jieyang vocantionaltechnical college诱变不同途径改良第4页/共39页 52、发酵工艺流程丝状菌发酵工艺流程：揭阳职业技术学院Jieyang vocantionaltechnical college沙土管斜面母瓶大米孢子种子罐繁殖罐发酵罐放罐第5页/共39页 6揭阳职业技术学院Jieyang vocantionaltechnical college冷冻管亲米生产米种子罐发酵罐放罐球状菌发酵工艺流程：第6页/共39页 7甘油、葡萄糖和蛋白胨组成的培养基斜面培养砂土孢子生产孢子的制备：大米或小米固体培养基上25℃培养7d，孢子成熟后真空干燥，低温保藏备用。3、发酵工艺过程第7页/共39页 8大规模发酵生产：采用三级发酵，其目的是使青霉菌菌体数量逐步扩大和适应发酵，其次是使发酵罐连续使用，缩短发酵周期。一级发酵：小罐，使孢子萌芽形成菌丝；二级发酵：大量繁殖青霉菌菌丝体；三级发酵：继续大量繁殖菌丝体，生产青霉素。揭阳职业技术学院Jieyang vocantionaltechnical college第8页/共39页 9发酵工艺控制要点：碳源、氮源的影响和控制：葡萄糖是容易利用的碳源，有利于菌体的生长；乳糖是青霉素生物合成最好的碳源。青霉素发酵中采用连续流加葡萄糖的方法，在发酵初期使青霉菌大量迅速强壮地繁殖菌丝体；发酵后期利用乳糖使青霉素大量合成。玉米浆是青霉素发酵最好的氮源。第9页/共39页 10前体的影响和控制：苯乙酸及其衍生物苯乙酰胺、苯乙胺、苯乙酰甘氨酸等均可以作为青霉素G侧链的前体物直接结合到青霉素分子中，也可以作为养料和能源被利用。苯乙酸、苯乙酰胺等对菌体生长和生物合成均有毒性。采用间歇或连续添加低浓度前体物质的方法，保持前体的供应率仅大于生物合成的需要，可以起到提高产量的作用。揭阳职业技术学院Jieyang vocantionaltechnical college第10页/共39页 11pH的影响和控制：青霉素发酵的最适pH一般认为是6.2-6.8，应尽量避免pH超过7.0。当pH高于最适pH时，通过补糖和生理酸性物质（硫酸铵等无机氮源）降低pH ；当pH低于最适pH时，通过补加CaCO3、氨水或尿素，也可提高通气量，促进有机酸氧化来提高pH。可利用自动加入酸或碱的方法维持pH。揭阳职业技术学院Jieyang vocantionaltechnical college第11页/共39页 12温度的影响和控制：青霉菌生长的适宜温度是30℃，分泌青霉素的适宜温度是20℃，通常采用分段变温控制法，使温度适合不同阶段的需要。0-56 h维持在27.2℃，然后恒速降温至18.7℃，并维持到184 h，最后24 h回复到27.2℃培养。这样变温培养法可比常温25℃培养产量增加16%。揭阳职业技术学院Jieyang vocantionaltechnical college第12页/共39页 13补料控制：中间补糖以控制糖浓度和pH；补加氮源可延长发酵周期、调节pH、提高青霉素产量，控制发酵液中的氨基氮含量在0.01%-0.05%。补加表面活性剂，如新洁尔灭50 mg/L、聚氧乙烯、山梨糖醇酐等也能增加青霉素的产量。加入少量可溶性高分子化合物，如聚乙烯醇、聚二乙胺或聚乙烯吡咯烷酮（PVP），能使青霉素产率提高38%。揭阳职业技术学院Jieyang vocantionaltechnical college第13页/共39页 14铁离子的影响和控制：Fe3+对青霉素生物合成有显著影响，一般当发酵液中含量超过30-40μg/ml，则发酵单位增长缓慢。铁制发酵罐在使用前必须进行处理，可在罐壁涂上环氧树脂等保护层，使Fe3+含量控制在30μg/ml以下。揭阳职业技术学院Jieyang vocantionaltechnical college第14页/共39页