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第1页/共125页北京大学生物化学19第2页/共125页Interphase (Long) G1: Cell growth S: DNA replicationG2: Cell growth1. G1期（gap 1 phase） 2. S期（synthesis phase） 3. G2期（gap 2 phase） 4. M期（mitosis phase） 5. G0期 M-phase= mitosis (Short)Chromosome segregationCytokinesis第3页/共125页2001年10月8日美国人Leland?Hartwell、英国人Paul Nurse、Timothy?Hunt因对细胞周期调控机理的研究而获诺贝尔生理医学奖。Leland H. Hartwell R. Timothy (Tim) Hunt Sir Paul M. Nurse 第4页/共125页第二节 细胞周期调控的关键分子细胞周期调控的核心蛋白：1.周期蛋白依赖性蛋白激酶(Cyclin-dependent kinases,Cdks)：细胞周期调节的中心环节 2.细胞周期蛋白(Cyclin) ：Cdk的正调节因子 3. Cdk抑制蛋白(Cyclin-dependent kinase inhibitors, CKIs)：Cdk的负调节因子 第5页/共125页一、细胞周期蛋白（Cyclins）细胞周期蛋白（Cyclins）是一类伴随细胞周期的不同阶段表达、累积和降解的蛋白质因子。 1、结构特点细胞周期蛋白盒(Cyclin box): 与Cdk结合，激活Cdk的蛋白激酶活性毁灭盒(Destruction box): 在Cyclin的自身降解中发挥重要作用2、调控机理Cyclin与Cdk形成二聚复合体：催化亚基为Cdk，调节亚基为Cyclin。 第6页/共125页第7页/共125页Destruction Box in Cyclins第8页/共125页3、分类：A-H不同类型的CDK/cyclin复合体Cyclin D包括D1-3，各亚型cyclin D在不同细胞中的表达量不同，但具有相同的功效。第9页/共125页细胞周期中不同类型cyclin的表达变化第10页/共125页二、周期蛋白依赖性蛋白激酶周期蛋白依赖性蛋白激酶(Cdks)是一类Ser/Thr蛋白激酶，在细胞周期的调节中起关键作用。人体细胞内主要有Cdk1/Cdc2、Cdk2~6、Cdk7/CAK和Cdk8等。 1、结构特点：3个主要功能域活性中心：ATP结合部位；催化部位调节亚基Cyclin的结合部位：正调节P13suc1的结合部位：负调节，阻止细胞进/退M期2、没有酶量的调节：在整个细胞周期中，某一Cdk的含量恒定，其活化Cdk与非活化Cdk的总量不变。 第11页/共125页CdK的结构Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ：抑制性磷酸化位点；cyclin结合位点；ATP结合位点Ⅵb: 催化部位Ⅶ: ATP结合位点Ⅷ: T-loop；活性磷酸化位点Ⅸ: 自身磷酸化位点第12页/共125页Cyclin ACdk2第13页/共125页CDK activating第14页/共125页3、组成、结构调节：活化与非活化Cdk的比例正性调节：人Cdk与特定的Cyclin 结合才有活性；也只有Cyclin降解才能使Cdk最终失活。 负性调节：CKI与Cdk结合后阻止Cdk磷酸化。 共价调节：抑制性位点磷酸化失活(Wee1激酶)；去磷酸化复活(Cdc25磷酸酶)。协调调节：人Cdc2的Thr 160/161和Thr 14/Tyr 15磷酸化，可促进Cdk-Cyclin结合。 这种磷酸化又依赖Cyclin，Cyclin与Cdk的结合可导致Cdk T环的移开，暴露出其中的Thr 160/161位点 。 第15页/共125页M-phase promoting factor = MPF =cdk1/cyclinBMPF activity controlled by: 1) cyclin B levels 2) phosphorylation of cdk1CDK激酶(CDK activating kinase，CAK)：磷酸化Thr161Wee1激酶：磷酸化Tyr15/Thr14Multiple levels of regulation provide input for“checkpoint control”第16页/共125页依赖Cyclin的蛋白激酶（Cdc/Cdk）种属 Cdk Cyclin 细胞周期或功能 裂殖酵母 Cdc2 CIG1CIG2Cdc13 G1SG2/M 出芽酵母 Cdc28 Cln1、Cln2、Cln3Clb3、Clb4、Clb5、Clb6Clb1、Clb2、Clb3、Clb4 G1SG2/M 哺乳动物