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- 2023-05-09 发布于北京
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本发明公开了一种双链环状DNA体外快速合成的方法,所述方法包括获得感兴趣的内源性eccDNA序列片段;然后根据序列片段的起止位点在设计PCR扩增引物,引物5‘端带上II型限制性内切酶识别位点序列;设计并合成linkerDNA的寡核苷酸序列SS和AS;通过高温变性低温退火将SS和AS互补连接为带有粘性末端的双链DNA;将扩增得到的产物与同样来源于内源eccDNA连接位点的linkerDNA进行混合;对混合物进行酶切‑连接的循环反应,获得足够多的eccDNA;再消化去除反应体系中的线性片段;经纯
(19)国家知识产权局
(12)发明专利申请
(10)申请公布号 CN 114908083 A
(43)申请公布日 2022.08.16
(21)申请号 202210839316.4
(22)申请日 2022.07.18
(71)申请人 中山大学附属第七医院(深圳)
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