岗梅磺基转移酶编码基因iasot6的克隆与蛋白表达.docxVIP

PAGE 4 岗梅磺基转移酶编码基因IaSOT6的克隆与蛋白表达 　　【摘要】目的 IaSOT6是由岗梅转录组中筛选出的1个可能编码磺基转移酶 (sulfotransferases, SOT)的基因，本实验对其进行克隆和表达，为后续研究岗梅磺化代谢奠定基础。方法 提取岗梅根RNA，反转录为cDNA，用RACE技术获得目的基因的全长，连接至载体pEASY；将SOT基因亚克隆至表达载体pET28a，构建重组质粒，在大肠杆菌E. coli中进行原核表达，用镍亲和层析法纯化蛋白 结果 获得IaSOT6的完整编码区，长969bp，编码一个322aa的蛋白, 蛋白质分子量大小为37.1kDa。S