无菌和微生物变更.pptxVIP

无菌和微生物变更第1页/共33页第2页/共33页2015版药典无菌变更内容第3页/共33页2015版药典无菌变更内容项目内容2010版药典2015版药典定义无菌检查法系用于检査药典要求无菌的药品、医疗器具、原料、辅料及其他品种是否无菌的一种方法。若供试品符合无菌检查法的规定，仅表明了供试品在该检验条件下未发现微生物污染。无菌检查法系用于检査药典要求无菌的药品、生物制品、医疗器具、原料、辅料及其他品种是否无菌的一种方法。若供试品符合无菌检查法的规定，仅表明了供试品在该检验条件下未发现微生物污染。检验环境无菌检查应在环境洁净度10000级下局部洁净度100级的单向流空气区域或隔离系统中进行，其全过程应严格遵守无菌操作，无菌检查应在无菌条件下进行，试验环境必须达到无菌检査的要求，检验全过程应严格遵守无菌操作，防止微生物污染，防止污染的措施不得影响供试品中微生物的检出。第4页/共33页2015版药典无菌变更内容项目内容2010版药典2015版药典检验环境单向流空气区、工作台面及环境应定期按医药工业洁净室（区）悬浮粒子、浮游菌和沉降菌的测试方法的现行国家标准进行洁净度验证。隔离系统按相关的要求进行验证，其内部环境的洁净度须符合无菌检查的要求。日常检验还需对试验环境进行监控。单向流空气区、工作台面及环境应定期按医药工业洁净室（区）悬浮粒子、浮游菌和沉降菌的测试方法的现行国家标准进行洁净度确认。隔离系统应定期按相关的要求进行验证，其内部环境的洁净度须符合无菌检查的要求。日常检验还需对试验环境进行监控。人员无菌检查人员必须具备微生物专业知识，并经过无菌技术的培训删除培养基N/A硫乙醇酸盐流体培养基主要用于厌氧菌的培养，也可用于需氧菌的培养；胰酪大豆胨液体培养基用于真菌和需氧菌的培养。第5页/共33页2015版药典无菌变更内容项目内容2010版药典2015版药典培养基的备及培养条件硫乙酵酸盐流体培养基：调节p H ,使灭菌后为7.1 土0.2。1.硫乙酵酸盐流体培养基：调节p H , 使灭菌后在2 5 ℃的p H 值为7.1 土0.2。除另有规定外，硫乙醇酸盐流体培养基置3 0?3 5 ℃培养。改良马相培养基：胨5.0g磷酸氢二钾 1. 0g酵母浸出粉2.0gd硫酸镁0.5g葡萄糖20. 0g水 1 0 0 0m l除葡萄糖外，取上述成分，混合，微温溶解，滤过，调节p H 约为6.8，煮沸，加入葡萄糖溶解后，摇匀，滤清，调节PH值使 灭菌后为6.4± 0. 2，分装，灭菌。改良马相培养基置23?2 8 ℃培养2.胰酪大豆胨液体培养基：胰酪胨 1 7 .0g 氣化钠 5.0g大豆木瓜蛋白酶水解物 3. 0g 磷酸氢二钾 2. 5g葡萄糖/无水葡萄糖 2. 5g/2. 3g 水 1 0 0 0m l除葡萄糖外，取上述成分，混合，微温溶解，滤过，调节p H 使灭菌后在2 5 ℃的p H 值为7. 3 ± 0. 2，加入葡萄糖，分装，灭菌。胰酪大豆胨液体培养基置20?2 5 ℃培养。第6页/共33页2015版药典无菌变更内容项目内容2010版药典2015版药典培养基的备及培养条件选择性培养基：按上述硫乙醇酸盐流体培养基或改良马丁培养基的处方及制法，在培养基灭菌或使用前加入适宜的中和剂、灭活剂或表面活性剂，其用量同方法验证试验。中和或灭活用培养基：按上述硫乙醇酸盐流体培养基或胰酪大豆胨液体培养基的处方及制法，在培养基灭菌或使用前加入适宜的中和剂、灭活剂或表面活性剂，其用量同方法适用性试验。营养肉汤培养基、营养琼脂培养基、改良马丁琼脂培养基删除胰酪大豆胨琼脂培养基、沙氏葡萄糖液体培养基、沙氏葡萄糖琼脂培养基第7页/共33页2015版药典无菌变更内容项目内容2010版药典2015版药典灵敏度检查菌液制备：接种金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌的新鲜培养物至营养肉汤培养基中或营养琼脂培养基上，接种生孢梭菌的新鲜培养物至硫乙醇酸盐流体培养基中，30?35℃培养18?2 4小时；接种白色念珠菌的新鲜培养物至改良马丁培养基中或改良马丁琼脂培养基上，23?28℃培养24?4 8小时，上述培养物用0. 9%无菌氯化钠溶液制成每lm l含菌数小于100cfu(菌落形成单位）的菌悬液。接种黑曲霉的新鲜培养物至改良马丁琼脂斜面培养基上，23?28℃培养5?7 天，加人3?5m l含0.05% (V/V)聚山梨酯8 0的0. 9 % 无菌氯化钠溶液，将孢子洗脱。然后，采用适宜的方法吸出孢子悬液至无菌试管内，用含0.05% (V/V)聚山梨醋8 0 的0. 9 % 无菌氯化钠溶液制成每lm l含孢子数小于100cfu的孢子悬液。菌液制备：接种金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌的新鲜培养物至胰酪大豆胨液体培养基中或胰酪大豆胨琼脂培养基上，接种生孢梭菌的新鲜培养物至硫