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- 2023-05-17 发布于上海
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生物选修血红蛋白的提取和分离第1页/共29页
本课题学习目标 简述蛋白质提取和分离的基本原理,并了解凝胶色谱法、电泳法等分离生物大分子的基本原理。1、主要概念:①凝胶色谱法 ②电泳法 ③缓冲溶液 ④它们在血红蛋白的提取中分别起到什么作用。2.主要原理:①凝胶色谱法分离蛋白质的原理 ②电泳法分离样品的原理 ③缓冲溶液的组成和作用机理3、课题重点:凝胶色谱法的原理和方法 4、课题难点:①样品的预处理 ②色谱柱填料的处理和色谱柱的装填。第2页/共29页
基础知识(一) 凝胶色谱法(分配色谱法)2.凝胶: 大多数凝胶是由多糖类化合物(如葡聚糖或琼脂糖)构成的多孔小球体,内部有许多贯穿的通道。 根据被分离的蛋白质相对分子质量的大小,利用具有网状结构的凝胶的分子筛作用,来进行分离。1.概念:3.凝胶色谱法的原理 ①当相对分子量不同的蛋白质通过凝胶时,相对分子量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道,路程较长,移动速度较慢;②而相对分子量较大的蛋白质无法进入凝胶内部的通道,只能在凝胶外部移动,路程较短,移动速度较快。相对分子质量不同的蛋白质分子因此得以分离。③依据的特性是:蛋白质分子量的大小。第3页/共29页
4.凝胶色谱法分离蛋白质的原理和具体过程第4页/共29页
凝胶色谱法分离蛋白质过程的动画演示第5页/共29页
(二)缓冲溶液 1.概念:
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