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                ——带你走进食用菌生产食用菌生产
项目四: 原种的生产(液体菌种生产)              任务1:液体菌种的优势                               ——液体罐菌种的生产
3大连全禾有限公司
4大连富森有限公司
5  食用菌液体发酵罐罐体有很多型号:50L,100L,200L,400L,600L等100L食用菌液体发酵罐体
6发酵罐培养基配方   1L的培养料:                   红糖    10g                   玉米粉   5g                   豆饼粉   10g                   蛋白胨   1.5g                   磷酸二氢钾 0.8g                   MgSO4        0.8g
7液体菌种生产工艺流程罐的清洗与检查→培养基的配制→上料→灭菌→降温→摇瓶接种→培养→接种栽培袋
81. 罐的清洗与检查(1) 清 洗:时 间:每一罐做完之后,新的一罐做之前。目 的:除去罐内所有污垢。方 法:清水冲刷。(2)检 查:检查各部件是否完好,有无渗漏,设备能否正常运转。(3)煮 罐:条 件:①、新罐第一次使用时;   ②、上一罐染菌时;③、更换品种时;      ④、长时间不用时。方 法:①、加水至试镜中线,扣上接种盖,微开排气阀。②、打开启动开关,进入灭菌状态,温度升到124℃时,计时,40分钟后,控制柜报警。③、关闭排气阀,关闭启动开关,闷罐20分钟,放水。
9  2.滤芯及无菌水的灭菌  ⑴、将进气管管口用8-10层纱布包好。  ⑵、选择容积是1000ml的广口烧瓶,加水750-780ml,盖棉塞,包牛皮纸。  ⑶、在压力是0.11-0.15MPa,温度121-126℃的条件下,计时60分钟。
10  3.培养基的制作  配 方:按生产品种配制。?   注:公司现有专用培养基。  4.上 料  将培养料加入培养器。
11  5.灭 菌  (1)、培养料加入培养器后,扣上接种盖,微开排气阀。  (2)、打开灭菌开关。  (3)、当罐温升到124℃,计时,此时开始排料:  排料时间:计时后0分钟、17分钟、35分钟各排料一次,每次排料3-5分钟,三次共排料3-5升。  排料部位:罐底下的各阀门,如进气阀、接种阀等同时排料。  排料方法:微微打开各阀门,只要有少量料液和蒸汽排出即可。
12  6.降 温(冷却)  (1)、计时结束,控制柜报警,开始降温。  停止排料。  通入循环冷却水。  在火焰的保护下,将进气管接到进气阀上。  (2)、并 瓶:  在接种室或接种箱内,在火焰的保护下,将液体专用母种捣碎倒入无菌水内。
13  7.接 种  (1)、准备工作:并好瓶的菌种,火圈,95%的酒精,火机,手套等。  (2)、接种过程:开打排气阀,当罐压降到接近于零时,迅速关闭排气阀,点燃火圈,旋开接种盖,在火焰的保护下,将菌种倒入罐内,把接种盖在火焰上烧一下,扣上旋紧,撤掉火圈,当罐压升到0.02MPa以上时,微微打开排气阀调整罐压,罐压调整在0.02-0.04MPa之间。  (3)、标记发酵罐接种日期,接种时间。
14  8.培养阶段  控制指标:  (1)、温度:一般品种采用温度24-26℃培养;高温品种采用温度28-31℃培养。  (2)、压力:0.03-0.05MPa。  (3)、空气流量:130型培养器空气流量不小于1.0立方米每小时。
15发酵罐接种
16  9.接 袋  (1)、生长周期:一般在液体罐内长好需要2-4天左右,此时菌液颜色变淡,菌球、菌液界限分明,菌液气味变淡了,取而代之的是菌丝的淡淡香味,菌球浓度70%以上就可以接袋了。培养3-4天菌球数量: 第一天  菌球数量20%左右 第二天  菌球数量50%左右 第三天  菌球数量70%以上培养后的菌种:菌球 、清澈。
17  (2)、接种枪及接种管的灭菌:  把接种枪枪口及接种管管口用8-10层纱布包好,外包牛皮纸。在压力是0.11-0.15MPa,温度121-126℃的条件下计时40min。
18  (3)、接袋过程:        取样,保证阀门畅通,在火焰的保护下,将进气管接到进气阀上。  调整罐压在0.05-0.08MPa之间。         关闭启动开关,打开接种阀,在接种室的接种机前接种。
19接 种
20液体接种菌袋发菌效果
21发酵罐操作的关键技术无菌操作理念①菌种 摇瓶 成功80%②灭菌 正常操作 无死角③空气过滤 0.01μm/一级过滤
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