荧光定量 PCR
所谓实时荧光定量PCR 技术,是指在PCR 反响体系中参与荧光基团,利用荧光信号积存实时监测整个 PCR 进程,最终通过标准曲线对未知模板进展定量分析的方法。
技术原理:将标记有荧光素的 Taqman 探针与模板 DNA 混合后,完成高温变性,低温复性,适温延长的热循环,并遵守聚合酶链反响规律,与模板DNA 互补配对的 Taqman 探针被切断,荧光素游离于反响体系中,在特定光激发下发出荧光,随着循环次数的增加,被扩增的目的基因片段呈指数规律增长,通过实时检测与之对应的随扩增而变化荧光信号强度,求得 CT 值,同时利用数个模板浓度的标准品作比照,即可得出待测标本目的基因的拷贝
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