酵母的提取鉴定和定量测定实验十.pptxVIP

酵母的提取鉴定和定量测定实验十; Ⅰ 提纯部分 浓盐法提取酵母RNA Ⅱ 定性鉴定部分 一、RNA基团鉴定 二、电泳分离鉴定 三、光谱鉴定 四、纯度鉴定 Ⅲ 定量测定部分 一、地衣酚法定量测定 二、紫外吸收法定量测定;;;生物大分子物质提取得基本原理与步骤;核酸得分布 DNA:细胞核(95%) 细胞器(5%) RNA:细胞质(75%) 细胞核(10%) 细胞器(15%) RNA以rRNA得数量最多(80％-85%);核酸提取得主要步骤 破碎细胞 去除与核酸结合得蛋白质以及多糖、脂类等生物大分子 去除其她不需要得核酸分子 沉淀核酸,去除盐类,有机溶剂等杂质;核酸分离纯化原则 保证核酸一级结构得完整性 排除其她分子得污染 简化操作,缩短时间,以减少各种有害因素对核酸得破坏 减少化学因素对核酸得降解(pH4-10) 减少物理因素对核酸得降解(机械剪切力 、 高温) 防止核酸得生物降解(DNA酶 、 RNA酶);大家有疑问的，可以询问和交流;实验原理 ; 稀碱法就是用氢氧化钠使酵母细胞壁变性、裂解,然后用酸中和,除去蛋白质和菌体后得上清液用乙醇沉淀RNA或调pH2、5利用等电点沉淀。提取得RNA有不同程度得降解。 浓盐法就是用高浓度盐溶液处理,同时加热,以改变细胞壁得通透性,使核酸从细胞内释放出来。 ; RNA提