初步优选三棱莪术抑制HaCaT细胞增殖最佳成分剂量组.docxVIP

初步优选三棱莪术抑制HaCaT细胞增殖最佳成分剂量组 引言 三棱莪术是一种传统中药，被广泛应用于治疗多种疾病，如消炎、抗肿瘤和抑制细胞增殖。HaCaT细胞是一种常用的皮肤角化瘤细胞株，在皮肤疾病研究中也被广泛应用。本研究致力于探究三棱莪术对HaCaT细胞增殖的影响，并初步优选最佳成分剂量组。 材料与方法 材料：三棱莪术粉，HaCaT细胞株，DMEM培养基，10% FBS, CCK8测定盒，透明底96孔板 方法： 1. HaCaT细胞培养 将冻存的HaCaT细胞株取出，接种于含有DMEM培养基和10% FBS的25cm2培养瓶中，放置于37℃恒温培养箱中，接种密度为5×104 cells/mL。每三天换一次完整的培养基直到细胞贴壁并先后生长至80%-90%的状态。 2. 三棱莪术制备 取三棱莪术粉10克，用纯水煎煮2小时，过滤后用纯水洗涤，过滤去污物，放置于环境下风干，贮存备用。 3. HaCaT细胞增殖试验 将HaCaT细胞洗涤2次，用0.25%胰酶消化15min，加入等分的DMEM培养基先行停止胰酶。通过多管牛奶吸管吹气，停止胰酶反应，用离心机离心取上清液，换掉蛋白质脱附液液体，加入全培养基放回恒温培养箱恢复生长，再进行CCK8测定。 4. CCK8试验 取三棱莪术煎液，不同浓度的三棱莪术煎液和不同的处理时间对实验组进行处理，各处理组设置6个重复，对照组加入等体积的纯水。观察细胞