胶原支架的制备及与血小板血浆复合.docxVIP

胶原支架的制备及与血小板血浆复合 一、胶原支架的制备 1. 材料准备 - 酸性胶原蛋白 - 碳酸氢钠 - 甲醛 - 无菌蒸馏水 - 75%酒精 2. 制备步骤 （1）将酸性胶原蛋白先溶解在1%(w/v)的酸性水溶液中，搅拌均匀，得到胶原溶液。 （2）将碳酸氢钠加入胶原溶液中，使pH达到9.0。 （3）将甲醛溶液加入胶原溶液中，使浓度达到0.5%(v/v)。 （4）搅拌胶原溶液，同时将其滴入无菌蒸馏水中，形成胶原凝胶。 （5）将胶原凝胶平铺在无菌培养皿中，加入75%酒精，处理1小时。 （6）将胶原凝胶取出，用无菌蒸馏水洗涤3-5次，除去多余的甲醛。 （7）将胶原凝胶切成适当大小的支架，放入无菌的密闭容器中，保存备用。 二、胶原支架与血小板血浆的复合 1. 准备血小板血浆 （1）静脉采集患者外周血，用无菌采血管采集2-3ml血液。 （2）将血液转移至无菌离心管中，离心10分钟，将上清液（血小板血浆）采集至新离心管中，离心5分钟，去掉上清液中的血小板。 （3）将得到的血小板血浆放入4℃保存。 2. 处理胶原支架 （1）将胶原支架浸泡在2%无菌乙醇中，振荡30分钟，将乙醇去除。 （2）将胶原支架烘干或冷冻干燥，保存备用。 3. 复合胶原支架与血小板血浆 （1）将干燥的胶原支架置于含有50μL血小板血浆的离心管内，静置1小时。 （2）倒置离心管，使支架上的血小板血浆流到管底。 （3）将剩余的