植物脱落酸受体PYL10在脱落酸结合前后的液体核磁共
植物脱落酸受体PYL10在脱落酸结合前后的液体核磁共振定量研究
引言
植物激素脱落酸(abscisic acid, ABA)在植物生长发育和逆境响应等生理过程中起着重要的作用。ABA通过与细胞内受体结合后调控下游基因的表达,进而影响植物生长和响应逆境。ABA的结合及信号转导的机制一直备受关注。近年来的研究发现,ABA与PYR1/PYL/RCAR受体家族结合,从而激活ABA信号转导通路。其中PYL10是脱落酸受体家族中的一个重要成员,但其在脱落酸结合前后的结构和动力学特性还未被深入探究。
液体核磁共振(Nuclear magnetic resonance, NMR)是一种非侵入性的分析方法,可以在溶液中描述分子的结构、动力学和相互作用等信息。本研究利用NMR方法研究了PYL10在脱落酸结合前后的结构和动力学特性,探究PYL10在ABA信号转导通路中的作用机制。
材料与方法
表达与纯化
本研究使用大肠杆菌中表达并纯化了PYL10和ABA结合后的复合物。在无脱落酸(apo)和ABA存在的条件下,用柱层析法纯化PYL10。结合脱落酸(holo)复合物通过柱层析法进一步纯化。
NMR实验
所有NMR谱图是在JEOL JNMR ECZ400R/S1(400 MHz)上获得的。超过90%的样品是在300 μM的一次标定标准使用10% D2O
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