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基因工程时的学习教案;第二节 基因工程的原理和技术;讨论: 怎样能够在大肠杆菌中产生人的胰岛素?;基因工程的基本操作程序主要包括 五个基本步骤：;1.第一步：获取目的基因 （1）方法： ①从基因文库中获取目的基因 ②利用聚合酶链式反应(PCR)技术扩增目的基因 （目的基因的序列已知） ③人工合成目的基因（目的基因的序列已知） ; 基因DNA文库的构建 将总DNA经过酶解，分离不同长短的DNA片段。包含的基因片段分别克隆在质粒或噬菌体载体上，转染细菌或体外包装到噬菌体颗粒上便构成了该生物的基因文库。;利用PCR技术扩增目的基因;;;实例 1：;2、形成重组DNA分子;目的基因与质粒的连接;常用的受体细胞：;1.将目的基因导入植物细胞;4.第四、五步：筛选含有目的基因的受体细胞和目的基因表达 （1）内容： ①检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因（关键） ②检测目的基因是否转录出了mRNA ③检测目的基因是否翻译成蛋白质（表达） （2）常用的技术： ①DNA分子杂交技术－DNA与DNA、mRNA杂交 ②蛋白质分子（抗原－抗体）间的杂交 ③个体水平的鉴定(根据性状如抗性);步骤四：筛选含有目的基因的受体细胞;　　用棉铃饲喂棉铃虫，如虫吃后不出现中毒症状，说明未摄入目的基因或摄入目的基因未表达。如虫吃后中毒死亡，则说明摄入了抗虫基因并得到表达。; 不能，受体细胞必须表现出特定的性状，才能说明目的基因完成了表达。;人们实现不同生物之间的基因转移，从而对生物进行定向改造，但为什么目的基因离开原来的生物，在新的细胞或生物体内能够表达出相同的性状？;山东卷26-(4). 转基因技术可以使某基因在植物体内过量表达，也可以抑制某基因表达。假设A基因通过控制赤霉素合成来控制番茄的株高，请完成如下实验设计，以验证假设是否成立。 ①实验设计：(借助转基因技术，但不要求转基因的具体步骤) a.分别测定正常和矮生植株的赤霉素含量和株高 b._____________________________________； c._____________________________________。 ②支持上述假设的预期结果： _______________________________________。 ③若假设成立，据此说明基因控制性状的方式： _______________________________________。;;（08山东卷·35）为扩大可耕地面积，增加粮食产量，黄河三角洲等盐碱地的开发利用备受关注。我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻新品系。 （1）获得耐盐基因后，构建重组DNA分子所用的限制性内切酶作用于图中的 处， DNA连接酶作用于 处。（填“a”或“b”） （2） 将重组DNA分子导入水稻受体细胞的常用方法有农杆菌转化法和 法。 （3）由导入目的基因的水稻细胞培养成植株需要利用 技术。该技术的核心是 和 。 （4）为了确定耐盐转基因水稻是否培育成功，既要用放射性同位素标记的 作探针进行分子杂交检测，又要用 方法从个体水平鉴定水稻植株的耐盐性。;（08山东卷·35）为扩大可耕地面积，增加粮食产量，黄河三角洲等盐碱地的开发利用备受关注。我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻新品系。 （1）获得耐盐基因后，构建重组DNA分子所用的限制性内切酶作用于图中的 处， DNA连接酶作用于 处。（填“a”或“b”） （2） 将重组DNA分子导入水稻受体细胞的常用方法有农杆菌转化法和 法。 （3）由导入目的基因的水稻细胞培养成植株需要利用 技术。该技术的核心是 和 。 （4）为了确定耐盐转基因水稻是否培育成功，既要用放射性同位素标记的 作探针进行分子杂交检测，又要用 方法从个体水平鉴定水稻植株的耐盐性。;（08广东卷·39） (现代生物科技专题，10分) 天然酿酒酵母菌通常缺乏分解淀粉的酶类，用作发酵原料的淀粉需经一系列复杂的转化过程才能被利用。研究者从某丝状真菌中获取淀粉酶基因并转人酿酒酵母菌，获得的酿酒酵母工程菌可直接利用淀粉产生酒精。请回答下列问题： （1）将淀粉酶基因切割下来所用的工具是 ，用