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本发明涉及突变体的筛选方法技术领域,尤其为利用PCR富集扩增法对抗逆性DNA聚合酶的高通量筛选方法,首先对Taq酶原始序列的确定,根据氨基酸序列进行基因合成,将目的片段构建入pET30a载体中,接着采用易错PCR对目的基因的核苷酸进行突变,并构建突变体表达文库,采用易错PCR对目的基因的核苷酸进行突变,取突变体库菌种1ml转接入50ml的LB培养基中,37℃在摇床上进行160rpm振荡培养,待菌液OD600达到0.5左右时,降温至30℃,本发明不需要进行荧光探针法检测,只需要采用常规的PCR条件
(19)国家知识产权局
(12)发明专利申请
(10)申请公布号 CN 116218811 A
(43)申请公布日 2023.06.06
(21)申请号 202211493335.2
(22)申请日 2022.11.25
(71)申请人 济凡生物科技 (北京)有限公司
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