实验三血清蛋白含量测定.pptxVIP

实验三血清蛋白含量测定;动 物 生 物 化 学 实 验;一、 实验目的;二、实验原理;光谱分析技术分类：;吸光度与透光度 ;Lambert-Beer定律 Lambert指出： 当一定的光线（I0）通过呈色溶液时，如果溶液的浓度（C）是一定的，则透过光线的强度（I）随通过液层的厚度（L）的增加成指数函数的减少，即 I=I0×10-KL;合并上两式： I=I0×10-KCL 取对数： -lgI/I0 = KCL A(OD) = -lgT = -lgI/I0 = lgI0/I = KLC; 故Lambert-Beer定律可表述为：当一单色光透过呈色溶液时，光密度或消光度与被测溶液的浓度，液层的厚度成正比；透光度的对数与其成反比。 A(OD) = -lgT = -lgI/I0 = lgI0/I = KLC; 据Lambert-Beer定律，当液层厚度单位为cm，浓度单位为mol/L时，吸光系数K称为摩尔吸光系数(ε)。 ε的意义是：当液层厚度为1cm，物质浓度为1mol/L时，在特定波长下的吸光度值。ε是物质的特征性常数。 A(OD) = εLC ;2.分光光度法的定量分析 直接计算法： A(OD) =εLC C = A