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PCR实验室样本采集、验收、拒收标准操作程序
.目的
保证所收集的标本符合实验要求;保证标本的保存质量。
.应用范围
核酸扩增荧光检测实验现行检测项目,如:GBS、HBV、HCV、TB、CT等
.责任人:
标本采集负责人:临床医师、护士 抽血室护士
标本运送负责人:医院临床保障组标本运送人员、检验科后勤组人员
标本验收负责人:标本接收组人员
.程序
1标本的采集
由临床医师、护士或抽血室护士根据规范采集。医护人员均需接受基因诊断实验室有 关核酸扩增技术,标本采集、保存、运输知识的统一培训。
分子生物实验室人员根据实验室检测所需制定采集标本要求,如下:
血液标本:根据不同检测项目选用相应抗凝剂的真空采集管采集血液标本。血清标
本采用不含抗凝剂的红头真空采血管,血浆标本采用EDTA抗凝的紫头真空采血管。HBV、 HCV、HSV不含抗凝剂或EDTA抗凝,HCMV、EBV采用EDTA抗凝。
痰标本:用带盖的无菌一次性塑料瓶收集清晨第一口痰标本送检。(对于无痰或少
痰的患者,可用45℃加温的100g/LNaCL水溶液雾化吸入或改变体位以使痰液易于咳出; 对于小儿可以轻压胸骨柄上方以诱导咳痰,用消毒棉拭子刺激喉咙部引起咳嗽反射,用 棉拭子采集标本。)
生殖道拭子:尿道或阴道分泌物由医生用专用的取样拭子(灭菌,一次性)采集样 本,及时送检。采集生殖道拭子标本,要求病人在采样前2小时内不能排尿,采样时, 将棉拭子伸入男性尿道及女性宫颈口2-3cni,转动一周以获得上皮细胞,将取样后的棉 拭子放入1. 0ml无菌生理盐水中漂洗片刻,在壁上挤干后丢弃。
咽拭子:由医生用专用的取样拭子(灭菌,一次性),适度用力拭抹咽后壁和两侧
扁桃体部位,应避免触及舌部;迅速将棉拭子放入装有1ml生理盐水的采样管中,在靠 近顶端处折断棉签杆,旋紧管盖并密封。
疱疹液:先用75%酒精对疱疹周围的皮肤进行消毒,然后用消毒针刺破疱疹,用棉签 蘸取泡液后,迅速将棉拭子放入装有1ml生理盐水的采样管中,在靠近顶端处折断棉签 杆,旋紧管盖并密封。
尿液:由病人自留尿液于无菌封闭的杯中送检。
乳汁:按无菌取材要求留取乳汁3~4ml与无菌试管或无菌瓶中送检。
其他体液及组织标本:由临床医生采集后放入消毒的容器中及时送检。
注意:所有上述用于临床标本采集的容器如试管或离心管,均应使用前高压灭菌。
2标本的运送程序
标本采集,密闭、标(贴)姓名,由专业运送人员2小时内送至检测实验室,如运送时 间需2小时以上,必须用冰盒送至实验室。
标本中如加入了适当的稳定剂,如用于RNA测定加入4moi/L异硫氨酸胭盐(GITC)的血 清(浆)标本和用于DNA测定的EDTA抗凝血等,则可在室温下运送或邮寄。
3标本的验收
3. 1验收步骤
3. 1. 1 签收
标本接收人员严格对各类标本的查对和双签名制度,对病房各样本及时进行验收、查对, 不符合要求的样本一律退回,并有书面记录。
3. 1. 2分类验收
一般内容
进入实验室的样本在进行编号(或贴条码)、离心前,标本接收人员应再次认真查对姓 名、联号、住院号、病区、床号、项目等。对不符合要求者应作记录,并及时通知采样科室, 正确及时地补采样,以免延误病人的检测结果报告。对书写不清楚的申请单,当事者要及时 与病房联系(可电话),明确受检者姓名、住院号、性别、年龄、病区、床号和检验项目等; 并作相应记录。
(2)按检测项目验证标本
GBS:生殖道分泌物或直肠分泌物。
HBV:所需标本类型为未溶血的血清或血浆,注意血浆标本所用的抗凝剂,用
EDTA-K2,不可使用肝素。标本为全血时及时分离出血浆保存。
HCV:同上,但标本为血清时,要在1小时内分离出血清用于检测。
TB:晨起第一口深部痰(不能为唾液)、胸腹水、脑脊液、脓液或穿刺液。
CT:尿道或生殖道分泌物。
HSV:血清、血浆或生殖道拭子;注意血浆标本所用的抗凝剂,用EDTA-K2,不可 使用肝素。
HPV:生殖道拭子。
4. 3.2标本的拒收
4. 3. 2. 1符合拒检的不合格病人标本的范围
实验室人员对标本进行查验,出现其他不合要求的情况(见表10T),,回退并告知相 关科室,做好登记。
表10-1不合格标本情况
类别 拒收原因
未正确使用抗凝剂的标本造成凝血的标本
严重溶血
严重脂血
采血量不足(血清<200uL、全血< 1mL)
检测项目TB的标本是唾液而不是晨痰
标本容器破裂,标本被污染
标本的病人姓名、年龄、性别等与检验单不相符
RNA检测,采样时间超过2小时
其他可能严重影响检验结果的原因
3. 2. 2拒检程序
(1)拒检的不合格标本应于LIS系统中回退,并登记在不合格标本处置记录本上。
(2)填写不合格标本处置单,并随同申请单送返送检科室。
(3)电话告之相关科室医生或护士,做好登记
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