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2015年生物化学与分子生物学实验课讲义.pdf

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    实验一 SD S碱裂解法小量制备质粒 一 、实验 目的 1 . 掌握 SD S碱裂解法小量制备质粒的原理和方法。 2 . 掌握高速离心机 、微量移液 等常规仪 的正确使用。 二 、实验原理 对培养的含有大量质粒的菌液,离心收集菌体,用含一定浓度葡萄糖的缓冲液悬浮菌体, 采用碱性SD S 裂解细菌的细胞壁，使质粒缓和释放出来。同时整个溶液的p H 为 12- 12.5, 使断裂成线性细菌染色体D N A 变成单链、相互交联缠绕附着在细胞壁碎片上，当液体 的pH 调至中性并有高浓度存在下

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