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碱性磷酸酶Km值的 第1页/共10页 底物浓度 酶浓度 pH 温度 激活剂 抑制剂 ※ 研究一种因素的影响时，其余各因素均恒定。 影响 酶促反应的因素 第2页/共10页 底物浓度对反应速率影响 在其他因素不变的情况下，底物浓度对反应速率的影响呈矩形双曲线关系。 第3页/共10页 [S]：底物浓度 V：不同[S]时的反应初速度 Vmax：最大反应速度(maximum velocity) Ｋm：米氏常数(Michaelis constant) 第4页/共10页 Km值 ① Km等于酶促反应速度为最大反应速度一半时的底物浓度。 ② 意义： a) Km是酶的特征性常数之一； b) Km可近似表示酶对底物的亲和力； c) 同一酶对于不同底物有不同的Km值。 第5页/共10页 Km Km＝[S] Vmax V [S] Km Vmax/2 第6页/共10页 双倒数作图法 Ｋm值与Ｖmax值的测定 第7页/共10页 注意事项 1 底物和酶取样准确 2 保温时间准确 1 2 3 4 5 6 7 加入酶的时间 加入碱性溶液 终止反应的 时间 9:00:00 9:00:30 9:01:30 9:02:00 9:02:30 9:03:00 9:01:00 9:15:00 9:15:30 9:16:00 9:16:30 9:17:00 9:17:30 9:18:00 保证每个试管的反应时间为15分钟 第8页/共10页 实验报告 1 绘制矩形双曲线图 2 绘制双倒数图，并通过双倒数图读出碱性磷酸酶对磷酸本二钠的Km值 第9页/共10页 感谢您的欣赏 第10页/共10页