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本发明涉及生物工程技术领域,具体提供一种sgRNA库、敲低基因文库及敲低基因文库的构建方法和应用。所述sgRNA库包括SEQIDNO.1~1740所示的序列。所述构建方法包括利用sgRNA库、酶切质粒、T4DNA连接酶、pirE.coli感受态细胞和MFDpirE.coli感受态细胞等构建MFD敲低质粒文库,以及利用Tn7转座系统,通过细菌接合将MFD敲低质粒文库转移至肺炎克雷伯菌中并插入基因组稳定遗传的步骤。本发明可以快速高效的构建大规模敲低基因文库,并且不受必需基因无法敲除、敲除缺失
(19)中华人民共和国国家知识产权局
(12)发明专利申请
(10)申请公布号 CN 113073099 A
(43)申请公布日 2021.07.06
(21)申请号 202110298385.4
(22)申请日 2021.03.19
(71)申
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