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烟大生化34的教案第1页/共100页 2023年6月13日2（一）DNA是生物遗传的物质基础——遗传信息的载体 遗传信息以密码的形式编码在DNA分子上，表现为特定的核苷酸排列顺序——三联体密码。一、基因信息的传递第2页/共100页 2023年6月13日3（二）中心法则DNARNAproteinreplicationtranscriptionreverse transcriptiontranslationreplication第3页/共100页 2023年6月13日4第4页/共100页 2023年6月13日5二、DNA的复制（一）DNA的存在形式 染色体与质粒严紧控制质粒单拷贝质粒：每个细胞内只有一个或少数几个拷贝松弛控制质粒多拷贝质粒：每个细胞内含有许多拷贝（20以上）第5页/共100页 2023年6月13日6第6页/共100页 2023年6月13日7第7页/共100页 2023年6月13日8第8页/共100页 2023年6月13日9第9页/共100页 2023年6月13日10以亲代DNA为模板产生子代DNA的过程最初→半保留复制（semiconservation replication）进一步研究:半保留复制为半不连续复制（semidiscontinuous replication） （二）DNA复制DNA的自我复制第10页/共100页 2023年6月13日11 DNA复制，双螺旋解开成单链，合成新的互补链 子代细胞出现新的DNA双链 其中一股单链是从亲代完整地接受 另一股单链完全重新合成，且按碱基配对原则互补1、半保留复制意义：保持DNA在代谢上的稳定性1953，Watson、Crick第11页/共100页 2023年6月13日122、DNA半保留复制的证据氮同位素示踪试验、放射自显影法（1958，Meselson、Stahl）第12页/共100页 2023年6月13日13第13页/共100页 2023年6月13日14（三）DNA复制的起点(origin)和方式复制子：控制复制起始（origin） 终止复制（terminus）复制子(replicon)：基因组能独立进行复制的单位原核生物：DNA环形，1个复制起点真核生物：DNA线形，多个复制起点第14页/共100页 2023年6月13日15复制方式双向复制(bi-directional) ：大多数复制从起点开始向2个方向复制2个复制叉(replication fork)单向复制(unidirectional) ：少数复制从起点向1个方向复制1个复制叉或生长点(growing point)第15页/共100页 2023年6月13日16第16页/共100页 2023年6月13日17第17页/共100页 2023年6月13日18第18页/共100页 2023年6月13日19（四）DNA复制的酶系1、解旋解链酶：1）拓扑异构酶（Topo，解超螺旋酶）：解开DNA超螺旋2）解链酶（解螺旋酶）：解开碱基间氢键，形成2股单链3）单链DNA结合蛋白（SSB）：结合单股DNA，阻止DNA复性2、引物酶：合成小段RNA引物，用于DNA聚合酶延长子链第19页/共100页 2023年6月13日20Topo 解开超螺旋Topo ⅠDNA单链断裂、重新连接每次只作用于一条链（催化瞬时的单链的断裂和连接）不需要能量辅因子（ATP、NAD）E.Coli：ω蛋白大白鼠肝：切割-封闭酶（nicking-closing enzyme）第20页/共100页 2023年6月13日21Topo Ⅱ同时断裂、连接双链DNA需要ATP、NAD亚类：DNA旋转酶（DNA gyrase）：原核；引入负超螺旋，复制中起重要作用转变超螺旋DNA（正、负超螺旋）：原核、真核无超螺旋的松弛形式（relaxed form）第21页/共100页 2023年6月13日22Topo Ⅰ：切开DNA中的一条链，与另一条链解缠绕或再缠绕→连接Topo Ⅱ同时切开DNA双链解旋或再螺旋→连接第22页/共100页 2023年6月13日23本质：切断DNA磷酸二酯键 改变DNA的链环数，再连接 兼具DNA内切酶、连接酶的性质 断裂、连接反应相互耦联不能连接事先已经存在的断裂DNA第23页/共100页 2023年6月13日24第24页/共100页 2023年6月13日25第25页/共100页 2023年6月13日26解链酶、SSB的作用解链酶（helicase，解螺旋酶）：断裂互补碱基间的氢键，使DNA双链分离形成“复制叉”单链DNA结合蛋白（SSB）：结合于解开的DNA单链，防止双螺旋再形成（阻止DNA复性）第26页/共100页 2023年6月13日27引物酶：合成RNA引物 D