实验细胞器分离.pptVIP

实验细胞器分离 第一页，共十一页，2022年，8月28日 [目的要求] (1)初步掌握细胞器的分离原理及一般方法。 (2)学习并掌握高速离心机和匀浆器的使用方法 实验二.细胞器的分离 第二页，共十一页，2022年，8月28日 [实验原理] 细胞器的分离常通过组织细胞匀浆、分级分离和分析三个步骤完成。 分级分离方法有两种，即：差速离心法和密度梯度离心法。 第三页，共十一页，2022年，8月28日 差速离心： 采取逐渐提高离心速度的方法分离大小不同的细胞器。 被分离的分子越小，需要的离心速度越高。  大颗粒首先沉到管底 较小颗粒沉降 第四页，共十一页，2022年，8月28日 速度区带分离法： 预先装入有一定密度梯度的材料（蔗糖或甘油），利用各种颗粒在梯度液中的沉降速度不同，使具有相同沉降速度的颗粒处于同一梯度层内。 注：待分离颗粒密度比介质密度都要大： 不能离心太久，否则两种颗粒都会沉到底部 第五页，共十一页，2022年，8月28日 [内容与方法] 内容： 大鼠肝细胞细胞核及线粒体的分离 第六页，共十一页，2022年，8月28日 方法： (3) 过滤： 将组织匀浆完毕，用尼龙网过滤，每组取2ml的过滤液移入离心管中。 (2)匀浆: