HG_T 4657-2014 纺织染整助剂 过氧化氢酶 酶活力的测定.docx

ICS 71.100.40 G 70 备案号：45366—2014 HG 中华人民共和国化工行业标准 HG/T 4657—2014 纺织染整助剂 过氧化氢酶 酶活力的测定 Textile dyeing and finishing auxiliaries—Catalase —Determination of enzyme activity 发布2014-05-12 2014-10-01实施 发布 中华人民共和国工业和信息化部 发布 I HG/T 4657—2014 前 言 本标准按照GB/T1.1-2009 《标准化工作导则 第 1 部分：标准的结构和编写》给出的规则起草。 本标准由中国石油和化学工业联合会提出。 本标准由全国染料标准化技术委员会印染助剂分技术委员会(SAC/TC134/SC1) 归口。 本标准起草单位：浙江传化股份有限公司、杭州传化精细化工有限公司 本标准主要起草人：傅佳亚、汪小燕、徐军、赵婷。 1 HG/T 4657—2014 纺织染整助剂 过氧化氢酶 酶活力的测定 1 范围 本标准规定了纺织染整助剂中过氧化氢酶酶活力的测定方法。 本标准适用于织物除氧工艺中所使用的过氧化氢酶类纺织染整助剂酶活力的测定。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 GB/T 601 2002 化学试剂 标准滴定溶液的制备 GB/T 603 2002 化学试剂 试验方法中所用制剂及制品的制备 GB/T 6682 2008 分析实验室用水规格和试验方法(mod ISO 3696:1987) GB/T 8170 2008 数值修约规则与极限数值的表示和判定 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 酶活力 enzyme activity 在规定条件下，以每毫升酶原液每分钟分解的过氧化氢的量(μmol) 表示，酶活力单位为μmol/ (mL ·min)。 4 原理 在一定条件下，过氧化氢酶能把过氧化氢分解为水和氧气。当过氧化氢酶与一定量过氧化氢反应， 用碘量法测定未分解的过氧化氢。即以钼酸铵作催化剂，过氧化氢与碘化钾反应生成游离碘，用硫代硫 酸钠滴定碘，通过换算得出未分解过氧化氢的量，进而计算得出已经分解的过氧化氢量。其反应式 如下： H?O?+2KI+H?SO?→I?+K?SO?+2H?O I?+2Na?S?O?→→2NaI+Na?S?O? 5 试剂和材料 除非另有规定，仅使用确认为分析纯的试剂和GB/T 6682 2008 规定的三级水。 5.1 硫酸溶液，1+9(体积比):量取10mL 浓硫酸，缓缓注入90mL, 水中，冷却，摇匀。 5.2 磷酸氢二钠溶液，0.2 mol/L: 称取71.6 g 十二水磷酸氢二钠，溶于1000mL 水中。 5.3 磷酸二氢钠溶液，0.2 mol/L: 称取31.2g 二水磷酸二氢钠，溶于1000mL, 水中。 5.4 pH=7.0 磷酸盐缓冲溶液：磷酸氢二钠溶液(5.2)与磷酸二氢钠溶液(5.3)以体积比6+4混合， 临用时配制。 2 HG/T 4657—2014 5.5 钼酸铵溶液，100g/L: 称取四水合钼酸铵10g, 溶于100mL 水中 5.6 碘化钾溶液，20%(质量分数) 5.7 过氧化氢溶液，0.06 mol/L: 称取30%的过氧化氢溶液0 . 68g, 用磷酸盐缓冲溶液(5.4)稀释至 100 mL。 5.8 硫代硫酸钠标准滴定溶液，c(Na?S?O?)=0.1mol/L: 按照GB/T 601 2002 的规定配制和标定。 5.9 淀粉指示液，5g/L: 按照GB/T 603 2002 的规定配制。 6 仪器和设备 6.1 分析天平：感量0.0001 g。 6.2 碘量瓶：250mL。 6.3 量筒：10 mL。 6.4 移液管：1 mL,5mL,25 mL。 6.5 碱式滴定管：50mL。 6.6 恒温水槽：能保持试验温度在30℃±0.5℃。 6.7 秒表：分格0.1 s。 7 测试步骤 7.1 试样稀释 7.1.1 按公式(1)计算试样的稀释倍数，准确移取一定体积的液体酶样，用水稀释定容。 式中： ………………… (1) c 硫代硫酸钠标准滴定溶液的物质的量浓度的数值，单位为摩尔每升(mol/L); K 样品的稀释倍数； 5— 反应时间的数值，单位为分钟(min); 10 被