生物化学 核酸.pptxVIP

生物化学 核酸;1.核酸的发现和研究工作进展 1868年 Fridrich Miescher从脓细胞中提取“核素” 1944年 Avery等人证实DNA是遗传物质 1953年 Watson和Crick发现DNA的双螺旋结构 1968年 Nirenberg发现遗传密码 1975年 Temin和Baltimore发现逆转录酶 1981年 Gilbert和Sanger建立DNA 测序方法 1985年 Mullis发明PCR 技术 1990年 美国启动人类基因组计划(HGP) 1994年 中国人类基因组计划启动 2001年 美、英等国完成人类基因组计划基本框架;脱氧核糖核酸(deoxyribonucleic acid, DNA);5.2 核酸的分子组成 5.2.1 元素组成 主要元素组成：C、H、O、N、P(9~11%) 与蛋白质比较，核酸一般不含S，而P的含量较为稳定，占9~11%。 ;5.2.2 核酸的组成;第6页/共97页;1.核酸基本构成单位： 核苷酸(nucleotide);⑴戊糖;⑵碱基;胺式亚胺式互变异构;酮式烯醇式互变异构;碱基的结构特征;⑶核苷(nucleoside) 碱基和核糖（或脱氧核糖）通过糖苷键连接形成核苷（或脱氧核苷）。;核糖核苷：AR, GR, UR, CR 脱氧核糖核苷：dAR, dGR, dTR, dCR;⑷核苷酸(ribonucleotide) 核苷（脱氧核苷）和磷酸以磷酸酯键连接形成核苷酸（脱氧核苷酸）。;常见核苷酸的结构与命名;2.核苷酸的其他形式 ⑴稀有核苷酸：稀有碱基/核苷/核苷酸 ⑵游离核苷酸及其衍生物： ①多磷酸核苷：NDP、NTP。 ②环化核苷酸：cAMP、cGMP等。 ③辅酶或辅基：NAD、NADP、FAD、CoA等，均含有AMP。 ④活性代谢物：尿苷二磷酸葡萄糖(UDPG)、胞嘧啶核苷二磷酸胆碱（CDP-胆碱），等。;⑴稀有核苷酸（修饰成分） 核酸中也存在一些不常见的稀有碱基（修饰碱基）。稀有碱基的种类很多，但含量很少，大部分是上述碱基的甲基化产物。;第19页/共97页;第20页/共97页;⑵核苷酸的衍生物 ①ATP;ATP的性质;②cAMP和cGMP ★cAMP(3’,5’-环化腺苷酸)和cGMP(3’,5’-环化鸟苷酸)的主要功能是作为细胞的第二信使。 ★cAMP和cGMP的环状磷酯键是一个高能键。在pH7.4，cAMP和cGMP的水解能约为43.9KJ/mol，比ATP水解能高得多。;③辅酶类核苷酸;④多聚核苷酸;5.3 核酸的结构 5.3.1 一级结构（primary structure） 一级结构是指核酸分子中核苷酸的排列顺序及连接方式。核苷酸的排列顺序代表了遗传信息。 1.核苷酸的连接方??：3?，5?磷酸二酯键 2.核酸的基本结构形式：多核苷酸链 信息量：4n 末端：5?端、3?端 多核苷酸链的方向：5?端→3?端(由左至右);RNA一级结构;3.表示方法：结构式、线条式、文字缩写;DNA双螺旋结构的研究背景 碱基组成分析——Chargaff 规则：[A]=[T]；[G]?[C] 碱基的理化数据分析：A-T、G-C以氢键配对较合理 DNA纤维的X-线衍射图谱分析;5.3.2 DNA的空间结构 1.DNA的二级结构（secondary structure） 碱基组成规则 ①Chargaff规则： [A]=[T]，[G]?[C]；[A]+[G]＝[T]+[C]（嘌呤与嘧啶的总数相等） ②有种属特异性 ③无组织、器官特异性 ⑤不受年龄、营养、性别及其他环境等影响; ;DNA双螺旋(B-DNA)结构的要点 ①DNA分子由两条多聚脱氧核糖核苷酸链（简称DNA单链）组成。两条链沿着同一根轴平行盘绕，形成右手双螺旋结构。螺旋中的两条链方向相反，即其中一条链的方向为5′端→3′端，而另一条链的方向为3′端→5′端。;②嘌呤和嘧啶碱基位于螺旋的内侧，磷酸和脱氧核糖基位于螺旋外侧。碱基环平面与螺旋轴垂直，糖基环平面与碱基环平面成90°角。;③螺旋横截面的直径约为2nm，每条链相邻两个碱基平面之间的距离为0.34nm，每10个核苷酸形成一个螺旋，其螺矩（即螺旋旋转一圈的高度）为3.4nm。;④维持两条DNA链相互结合的力是链间碱基对形成的氢键。碱基结合具有严格的配对规律：A与T结合，G与C结合，这种配对关系，称为碱基互补。A和T之间形成两个氢键，G与C之间形成三个氢键。 在DNA分子中，嘌呤碱基的总数与嘧啶碱基的总数相等。;第36页/共97页;⑤螺旋表面形成大沟（major groove）及小沟（minor groove），彼此