元蘑液体菌种生产技术规程.pdf

DB23/T XXXX—XXXX 元蘑液体菌种生产技术规程 1 范围 本文件规定了元蘑 （Hohenbuehelia serotina）液体菌种生产的环境卫生要求、生产仪器和设备、 菌种选择、母种制备、摇瓶液体种制备、液体种发酵罐空消、制备发酵罐液体种培养基、发酵罐液体种 的接种、发酵罐液体种培养条件、发酵罐液体种检测、发酵罐液体种质量要求、栽培种接种、生产档案。 本文件适用于元蘑液体菌种生产。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本 （包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB 150 压力容器 GB/T 1921 工业蒸汽锅炉参数系列 GB 5749 生活饮用水卫生标准 GB/T 11165 实验室pH计 GB/T 13554 高效空气过滤器 GB 19153 容积式空气压缩机能效限定值及能效等级 GB 50073 洁净厂房设计规范 NY/T 528 食用菌菌种生产技术规程 3 术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4 环境卫生要求 4.1 生产环境 应符合NY/T 528 的规定。 4.2 生产车间 应符合GB 50073 的规定。 5 生产仪器和设备 液体种发酵罐质量应符合GB 150 的规定。 空气压缩机质量应符合GB 19153 的规定。 空气过滤器质量应符合GB/T 13554 的规定。 pH计质量应符合GB/T 11165 的规定。 1 DB23/T XXXX—XXXX 蒸汽锅炉质量应符合GB/T 1921 的规定。 超净工作台、高压蒸汽灭菌锅、恒温培养箱、恒温振荡培养箱、冰箱、显微镜、液体菌种接种枪、 磅秤、天平应符合NY/T 528 的规定。 6 菌种选择 选择菌丝生长健壮、产量高、抗逆性强、抗杂菌能力强的元蘑菌种。 7 母种制备 7.1 母种培养基的制作 制作马铃薯葡萄糖琼脂培养基 （PDA），装入试管 （18mm × 180mm 或20mm × 200mm）中， 分装量应为试管长度的1/5～1/4，应使用棉塞或硅胶塞封口，其中棉塞应使用梳棉，不应使用脱脂棉。 将试管放入高压蒸汽灭菌锅中，在0.105 Mpa～0.125 Mpa下灭菌30 min。灭菌后摆放成的斜面培养基 顶端应距试管口≥50mm。 7.2 接种与培养 在无菌条件下，用接种钩取黄豆粒大小的原种接种在母种培养基上。母种培养的温度应为22℃± 1℃，空气相对湿度控制在65%～75%，通风、避光培养8 d～10 d。 8 摇瓶液体种制备 8.1 摇瓶液体种培养基配方 培养基配方：玉米粉10 g、葡萄糖20 g、酵母粉5 g、蛋白胨3 g、磷酸二氢钾2 g、硫酸镁 1 g、 水1000 mL。水的质量应符合GB 5749 的规定。 8.2 摇瓶液体种培养基的制作、灭菌 将配方中的原料充分混合均匀，装入500mL或1000mL、耐 126℃高温、无色或近无色的玻璃三角 瓶中，装液量应为三角瓶体积的1/4，用16cm × 16cm聚乙烯透气封瓶膜封口。在0.105Mpa～0.125 Mpa下灭菌30 min。 8.3 摇瓶液体种的接种与培养 在无菌条件下，用接种铲将母种接入摇瓶液体种培养基中，置于恒温振荡培养箱，在22℃以140 r/min振荡培养5 d～7 d。 9 液体种发酵罐空消 液体种发酵罐初次使用，或出现染菌，或长期放置时，应检查发酵罐上全部阀门和压力表，进行空 消。空消时罐内蒸汽压力应控制在0.105 Mpa～0.125 Mpa、温度应控制在 121℃～124℃灭菌40 min。 10 制备发酵罐液体种培养基 10.1 发酵罐液体种培养基配方 在8.1的基础上应加入2.9 mL/L的消泡剂。 2 DB23/T XXXX—XXXX 10